微生物学 实验 放线菌的形态观察.ppt

实验三 放线菌的形态观察 一、实验的目的 1、学会用”印片法” 法制作标本片。 2、观察放线菌的群体形态及个体形态特征。 二、实验原理 同细菌简单染色法，放线菌也可用石炭酸复红或吕氏碱性美蓝等染料着色后，在显微镜下观察其形态。 放线菌是呈丝状生长的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的基内菌丝和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆形。孢子丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。 由于孢子丝在菌落表面，可以采用印片法把孢子丝印在载玻片上，从而可以看到完整的自然状态下的孢子丝形态。 细黄链霉菌(Streptomyces microflavus) 显微形态：单细胞菌丝体，菌丝内一般无隔膜。 菌丝体分为三部分： 1、基内菌丝—深入培养基中的营养型一级菌丝（较透明、颜色浅色）。一般无隔膜，直径0.2～0.8 μm，可产生各种色素。 2、气生菌丝—由基内菌丝从培养基向上伸展的二级菌丝（颜色较深），直径1～1.4 μm 。 3、孢子丝——有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮生三种。 分生孢子形态 孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和杆状。孢子有各种颜色。这些形态特点都是鉴别放线菌的重要依据。 三、材料 1、菌种：“5406”放线菌培养72 h的平板培养物； 2、染料：蕃红； 3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊子、接种针、接种铲等。 四、方法及步骤 1、印片。取2片干净的载玻片，用解剖刀无菌挖取一块放线菌的菌落（注：带培养基切下），放在一块载玻片的中央（注：菌落面朝上）；用另一干净的载玻片盖在这一菌落上轻轻按压，再小心取下这块载玻片（注：不要使菌落移动）。 2、干燥固定。将取下的上面的载玻片在酒精灯火焰高处烘烤干燥（注：有菌落的面朝上）；然后迅速通过火焰2～3次，加热固定。 3、染色及干燥。滴加适量番红染液，染色1 min；水洗至流出液为无色； 在酒精灯高处加热干燥。 4、镜检。先用低倍镜寻找视野，然后用油镜进行观察。注意区分气生菌丝、孢子丝和孢子的形态及排列方式。 1.描述放线菌5406的菌落特征（大小、形状、颜色、边缘情况等特征）。 2.绘制观察到的放线菌气生菌丝及孢子丝形态。 五、观察与绘图