2.2 动物细胞工程 课件高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第1节：动物细胞工程-1动物细胞工程的应用动物细胞培养需要哪些基本条件？动物细胞培养的基本操作过程是什么？选择性必修3

在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?从社会中来可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增。目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。

动物细胞工程动物细胞培养动物细胞融合动物细胞核移植基础一、动物细胞培养动物细胞培养是指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件

动物细胞培养所需基本条件其他条件营养条件糖类、氨基酸无机盐、维生素血清……无菌、无毒的环境适宜温度、pH和渗透压适宜的气体环境1.动物细胞培养的条件

营养+合成培养基血清将细胞所需的营养物质(糖类、氨基酸、无机盐、维生素……)按种类和所需量严格配制而成的培养基。人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。①成分定义原因②状态培养动物细胞一般使用液体培养基，也称培养液。

无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行灭菌②在无菌环境下进行操作③定期更换培养液以便清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

温度、pH和渗透压①哺乳动物细胞培养温度:(36.5±0.5℃)②多数动物细胞生存的适宜pH:7.2~7.4③细胞必需生活在等渗环境中培养液中的无机盐可维持细胞渗透压，如：Na+等

气体环境①气体组成：95%空气+5%CO2氧气细胞代谢必需维持培养液pH②培养装置:培养皿或松盖培养瓶CO2培养箱置于

传代培养取动物组织制成细胞悬液原代培养放入CO2培养箱中培养放入CO2培养箱中培养用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞2.动物细胞培养的过程

2.动物细胞培养的过程机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养①常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？说明细胞间的物质主要是蛋白质胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。

2.动物细胞培养的过程②胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养

2.动物细胞培养的过程③为什么要将动物组织块分散成单个细胞？成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞生长和增殖机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养

2.动物细胞培养的过程④体外培养动物细胞分为两类第1类：悬浮生长细胞细胞能够悬浮在培养液中生长增殖第2类：贴壁生长细胞细胞需要贴附于某些基质(如培养瓶壁)表面才能增殖(主要类型)机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养

2.动物细胞培养的过程⑤细胞贴壁悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养

2.动物细胞培养的过程⑥接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。机械方法胰蛋白酶处理胶原蛋白酶处理动物组织块分散成单个细胞加培养液细胞悬液原代培养放入培养瓶在适宜条件在适宜条件分瓶培养传代培养

⑥接触抑制肿瘤细胞失去接触抑制，在培养液可以无限增殖下去。形成一层细胞可形成多层细胞

2.动物细胞培养的过程原代培养在适宜条件分瓶培养传代培养⑦原代培养将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经过处理后的初次培养称为原代培养。⑧传代培养将分瓶后的细胞培养称为传代培养。

2.动物细胞培养的过程原代培养在适宜条件分瓶培养传代培养⑨为什么要进行分瓶培养悬浮生长贴壁生长细胞密度过大有害代谢物积累培养液中营养物质缺乏接触抑制细胞分