第四章目的基因的转化及其原理.pptx

第四章目的基因的转化及其原理;一、植物基因工程载体命名规则及种类;;2、植物基因工程载体得种类及特性;二、根癌农杆菌Ti质粒得结构与功能;一、Ti质粒得遗传特性、结构及功能;;2、Ti质粒得功能区域;;大家有疑问的，可以询问和交流;3、Ti质粒得生物学功能;表4-1Ti质粒放入部分基因及其功能;二、T-DNA得基因结构与功能

;GGCAGGATATATATTCAATTGTAAT;2、T-DNA得结构特点;T-DNA得两端左右边界各为25bp得重复序列,即边界序列(bordersequence),分别称之为左边界(BL或TL)和右边界(BR或TR)。

该25bp边界序列属保守序列,但通常右边界(TR)序列更为保守,左边界(TL)序列在某些情况下有所变化。其核心部分就是14bp,可分为10bp(CACGATATAT)及4bp(GTAA)两部分,就是完全保守得。

致瘤性:右边界作用大于左边界;3、T-DNA上得编码基因及功能

;;T-DNA区基因得功能;三、Vir区操纵子得基因结构与功能;表4-4章鱼碱型Ti质粒vir基因基本结构与功能;三、农杆菌Ti质粒基因转化机理

;1、T-DNA得加工及转移

;四、T链整合植物基因组得分子机理;2、T-DNA得整合机理

;;;Fig4-6IllegitimaterebinationmodelsforT-DNAintegration、(a)Double-strandbreak-repair(DSBR)andsingle-strandgap-repair(SSGR)modelsequallyexplaintheintegrationeventsleadingtoT-DNAinsertion621-x34、AsoutlinedintheDiscussion,theDSBRmodelpredictsadouble-strandbreakinthetarget、UnwoundorexonucleaseprocessedendsoftheT-DNAandofthetargetannealbypartialhomologouspairing、Single-strandoverhangsareremovedbyendo-orexonucleasedigestion;theendsarerepairedandligated、TheSSGRmodelpredictsanickinthetargetthatisconvertedtoagapbya5-3exonuclease、TheT-strandinvadesthegapandasynapsisisformedbypartialpairingbetweenT-DNAendsandtarget、TheoverhangsoftheT-DNAareremovedandtheT-strandisligatedtothetarget、AnickintroducedintothesecondstrandofthetargetinitiatesrepairsynthesisofthesecondstrandoftheT-DNA、(b)ApplicationoftheSSGRmodelforT-DNAinsertion621-36、Asproposedinthemodelofinsertion621-x34,repairattheendsofinvadingT-strandmayoccurbeforeligation、AbsenceofaninternalCAGTT-DNAsequencefromtherightjunctionofinsert621-36suggeststhatcopyingofthetargetplantDNAledtoalterationoftherightT-DNAendduringintegration、Mismatchrepairmaysimilarlyexplaintheobserveddeletion、(c)AmodifiedversionofSSGRmodelexplainingpossibleinvolvementofVirD2proteinin