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家蚕对苏云金芽孢杆菌免疫反应的基因表达谱研究的中期报告
本研究旨在研究家蚕对苏云金芽孢杆菌免疫反应的基因表达谱。截至目前,我们已经完成了实验室实验部分,分别包括样本收集、RNA提取、RNA浓度检测、RNA质量检测、cDNA合成、cDNA浓度检测和荧光定量PCR等。
在样本收集方面,我们选择了经过苏云金芽孢杆菌感染72小时的家蚕中肠作为实验材料。收集到的样本经过液氮冷冻保存,以备后续的RNA提取。RNA提取过程中,我们采用TIANzol RNA提取试剂盒进行提取。通过Agilent 2100生物分析仪检测RNA浓度和质量,确保提取的RNA完整并且没有降解。
接下来,我们对提取的RNA进行cDNA合成。首先,利用PrimerScript RT Master Mix进行反转录反应,将RNA转录为cDNA。接着,用SYBR Green PCR Master Mix进行qPCR实验,检测不同基因在不同条件下的表达。我们选择了12个基因进行研究,包括免疫应答相关的基因和参考基因。在荧光定量PCR实验中,我们分别检测了不同时间点和不同苏云金芽孢杆菌浓度下基因的表达情况。
初步数据分析结果表明,苏云金芽孢杆菌感染后,家蚕中的免疫应答基因的表达量有显著增加。该研究有望为探讨家蚕对苏云金芽孢杆菌免疫反应的分子机制提供理论基础。
下一步,我们将继续进行实验室实验,收集更多数据,并进行更为深入的分析。同时,也将探索更多的分析方法,如RNA测序,以期得到更加准确的结果。
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