实验诊断学临床常用临床免疫学检测教学课件.ppt

常见肿瘤首选标志物 原发性肝癌：AFP+AFU 结直肠癌：CEA 前列腺癌：PSA+PAP 小细胞肺癌：NSE 绒毛膜上皮细胞癌：hcG 胰腺癌、胆道癌：CA19-9 卵巢癌：CA125 乳腺癌：CA15-3 胃癌：CA72-4 思考题： 1.何谓肿瘤标志物？ 2.简述常见的肿瘤标志物及临床意义？详述AFP检测的临床意义？ 3.肿瘤标志物的选用原则如何？ 第五节 自身抗体检测 1.自身耐受--正常情况下，机体能识别自我，对自身组织成分不产生免疫应答。 2.自身免疫--当某些原因削弱或破坏机体的自身免疫耐受时，机体的免疫系统就会对自身组织成分产生免疫应答。 3.自身免疫病（AID）--因自身免疫反应而产生的疾病称为自身免疫病。 4.自身抗体（autoantibody）：是指针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体，是自身免疫和自身免疫病的重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱)。 一、类风湿因子（RF）测定 1．原理：类风湿因子（RF）是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内，以IgM型为主，也有IgG、IgA、IgD和IgE型。RF与体内变性IgG结合形成免疫复合物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质导致组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎。 2．方法：乳胶凝集法（IgM型）和免疫比浊法。 3．临床意义：类风湿性疾病时，RF的阳性率高达70-90%，其他自身免疫性疾病如：SLE、RA、硬皮病、干燥综合症等也见RF阳性，某些感染性疾病如结核病等也多为阳性反应。本法特异性不高，应予鉴别。 常用方法：ELISA 临床意义：RA特异性自身抗体，敏感性65%~85%，特异性为94%~98%；高浓度抗CCP抗体是RA发生关节侵蚀的危险因子之一，定量检测有助于判断预后。 附：抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） 二、抗核抗体（antinuclear antibody,ANA） 1. 概念： ANA是指抗细胞核和细胞浆成分的自身抗体总称。这种抗体无器官和种族特异性。 2. 方法：间接免疫荧光法（IIF），以Hep-2细胞或鼠肝作抗原。在荧光显微镜下可观察到不同的荧光模型：均质型、核膜型（又称周边型）、颗粒型、核点型、着丝点型、核仁型 ，代表不同的临床意义。 3. 临床意义：可作为自身免疫性疾病的筛选试验，见于多种自身免疫病，最多见于未治疗的SLE，阳性率达80-100%，活动期SLE几乎100%阳性。 间接免疫荧光法示意图 HEp-2细胞 肝组织切片 荧光标记抗体 病人血清（待检抗体） 抗dsDNA抗体 抗ssDNA抗体 抗组蛋白抗体 抗核小体抗体 抗U1-nRNP抗体 抗Sm抗体 抗SSA抗体 抗SSB抗体 均质型 颗粒型 核膜型 （周边型） 核点型 抗dsDNA抗体 抗p80盘曲蛋白抗体 抗Sp100抗体 三、可提取性核抗原抗体谱（extractable nuclear antigens，ENA） 1．概念：ENA是指可提取的可溶性核抗原，由多种相对分子质量不同的多肽构成，即Sm、nRNP、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1等。 2．方法：免疫印迹试验（IBT）等。 3. 临床意义： a)抗Sm抗体—SLE特异性最高的标志性抗体，与疾病诊断高度相关 （25-40%） b)抗nRNP抗体—MCTD（混合性结缔组织病）：100%阳性；SLE： 26-45%阳性 c)抗SSA抗体—SLE：30-40%；SjS（干燥综合症）：60-75% d)抗SSB抗体—SjS：50-60% e)抗Scl-70抗体—PSS（进行性系统性硬化症）：30-60% f)抗Jo-1抗体—与肌炎伴间质性肺纤维化相关 ，PM（多发性肌炎）：20-35% 免疫印迹法 SDS电泳 转移电泳 酶免疫检测 免疫印迹法 四、抗DNA抗体 1.概念：以细胞核DNA结构为靶抗原，包括抗双链（ds）、单链（ss）和Z-DNA抗体。 2.方法：免疫荧光法，滴金免疫法 3.意义：（1）抗ds-DNA阳性：与SLE活动性密切相关，活动期SLE70-90%阳性，特异性高（95-100%），但敏感性低（仅为30%～50%），在SLE特别是并发狼疮性肾炎患者的发病机制中起重要作用；（2）抗ss-DNA阳性：见于SLE（70-95%），尤其是合并有狼疮性肾炎。 看抗飞核看小体抗体 核小体（nucleosome）是真核生物细胞核染色质的基本单位 。凋亡细胞是核小体的重要来源，当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低，导致核小体在患者体内大量存积，激活B细胞产生抗核小体抗体（Antinucleosome antibody ,An