五味子甲素对NLRP3炎性小体活性的抑制作用及机制初步-药学学报.PDF

80 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 17, 52 ( 1): 80 85 · 究论文· 味子甲素对NLRP3 炎性小体活性的抑制作用及机制初步研究 1, 2† 1† 3† 4 1, 5 2 1 崔鹤蓉 , 李朋彦 , 李雨萌 , 王睿林 , 何娟娟 , 桑秀秀 , 蔡光明 , 1 1 1* 4* 牛 明 , 王伽伯 , 柏兆方 , 肖小河 (1. 解放军302 医院全军中医药研究所, 北京 100039; 2. 承德医学院, 河北 承德 067000; 3. 秦皇岛市第一医院, 河北 秦皇岛 066000; 4. 解放军302 医院中西医结合医学中心, 北京 100039; 5. 株洲千金药业股份有限公司, 湖南 株洲 4 12000) 摘要: 探讨五味子甲素 (deoxyschizandrin, schisandrin A) 对小鼠骨髓来源巨噬细胞 (BMDM) 中 NLRP3 (NOD-like receptor family, pyrin domain containing 3) 炎性小体活性的抑制作用及初步机制。CCK-8 法检测细胞 毒性, 根据细胞存活率确定给药浓度。通过Western blot 方法检测细胞培养上清中IL-1 和caspase-1 的表 , 分 析不同浓度的五味子甲素 (25 、50 、100 和 200 μmol ·L 1) 对尼日利亚菌素 (nigericin, Nig) 和三磷酸腺苷 (adenosine triphosphate, ATP) 诱导的NLRP3 炎性小体活化的影响, 检测细胞中 pro-caspase-1 、pro-IL-1 、ASC 和NLRP3 等蛋白的表达变化; 免疫荧光技术分析NF-κB (p65) 的入核情况。根据CCK-8 法的结果, 确定了五味 子甲素的给药浓度范围为6.25～400 μmol ·L 1 。在25～200 μmol ·L 1 浓度内, 五味子甲素能够抑制Nig 和ATP 引 起的 NLRP3 炎症小体活化, 进而抑制 IL-1 的分泌。免疫荧光和 Western blot 实验结果显示, 五味子甲素对 NLRP3 炎症小体活性的抑制作用不依赖于NF-κB 通路活性及其诱导的NLRP3 、ASC 和pro-IL-1 等炎性小体蛋 白的表 。综上, 本实验首次证实, 五味子甲素在一定浓度范围内通过阻断 caspase-1 活化, 抑制 caspase-1 对 pro-IL-1 的剪切活化, 进而抑制NLRP3 炎性小体的活性, 减轻免疫炎症反应。本研究为五味子甲素防治NLRP3 炎性小体相关的疾病提供了参考依据。 关键词: 五味子甲素; NLRP3 炎性小体; 炎症反应; caspase- 1 中图分类号: R963 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 17)