实验三蛋白质的盐析分离及凝胶层析.ppt

生物化学实验Biochemical Experiment;实验成绩评分方法;本学期实验课安排;11月13日;有关网址和参考书目;２、蛋白质的盐析分离和凝胶层析脱盐;蛋白质提取、分离、纯化及鉴定技术;蛋白质的分级分离（粗分级）;二、有机溶剂沉淀分离 有机溶剂沉淀出的蛋白质沉淀比盐析沉淀出的蛋白质沉淀易于过滤或离心分离，分辨率好，但容易使蛋白质变性，通常在低温下进行。 三、选择性沉淀法（等电点、热变性、酸碱变性等） 四、吸附法 五、重金属盐沉淀法;蛋白质的进一步纯化（细分级）;一些常用的蛋白质纯化中的仪器;色谱工作站 WINDOWS 98 作为色谱分析的数据采集和处理，后端采用数据库工具 MS-SQL 在网络上进行分析结果的存档、检索及打印等。 ;高效液相色谱仪 ; 气相色谱仪 ;蛋白质的盐析分离原理;凝胶层析原理;;凝胶层析载体;实验步骤（一）卵球蛋白的沉淀;实???步骤（二）卵球蛋白的脱盐;注意事项 实验完毕后，将凝胶全部回收处理，以备下次实验使用，严禁将凝胶丢弃或倒入水池中。 样品溶液的浓度大一些好，但粘度不宜大，加样体积通常为凝胶柱床体积的1%-10%。 洗脱用的液体与凝胶溶涨和凝胶平衡时所用的一样。 洗脱速度要恒定。 凝胶暂时不用时，要加防腐剂（如0.02%叠氮化钠溶液） 再次使用凝胶时可再生后使用 ;蛋白质洗脱曲线记录方式;盐离子检测方法;思 考