人教版选修3专题一第四节蛋白质工程的崛起（共45张PPT）.ppt

目的基因与运载体有几种组合? (1)过程①表示的是采取 的方法来获取目的基因。 （2）根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应 用限制酶 切割质粒，用限制酶 酶切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过 原则进行连接。 (3)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是 。 反转录法（人工合成法） Ⅰ Ⅱ 碱基互补配对 人的基因与大肠杆菌DNA的双螺旋结构相同 (4)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为 。 写出目的基因导入细菌中表达的过程 。 (5)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了 ，反之则没有导入。 共用一套（遗传）密码子 生长激素基因 → mRNA → 人生长素 人生长激素基因 2.（9分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。 又称克列诺片段，是大肠杆菌聚合酶I的大片断，对突出的粘末端可以催化产生平末端，用于后续的平端连接 （1）Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA有_______个碱基对。 （2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。 ①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它_________________________。 ②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是___________________________。 ③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有_______________。 DNA聚合酶 126 繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少 保证目的基因和载体定向连接（或防止目的基因 和载体在酶切后产生的末端发生任意连接) 标记基因 （3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_______________。 （4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是____________________。 合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象　　 蛋白质工程、基因工程 3．(广东卷39)（《现代生物科技专题》，10分） 天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： （1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。 限制酶 DNA连接酶 导入酿酒酵母菌 （3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？ ? （2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用 检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。 DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交或淀粉酶活性 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈 测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量 （4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？ ①工具酶主要来自微生物； ②最重要的目的基因供体库之一； ③目的基因的载