单亲灭活柠檬酸杆菌与奇球菌原生质体融合.PDF

微生物学通报 JUL 20, 2010, 37(7): 975−980 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 单亲灭活柠檬酸杆菌与奇球菌原生质体融合 1 1,2* 1 2 1 任柏林 谢水波 刘迎久 刘金香 唐东山 (1. 南华大学污染控制与资源化技术湖南省重点实验室 湖南 衡阳 421001) (2. 南华大学铀矿冶生物技术国防重点学科实验室 湖南 衡阳 421001) 摘 要: 利用单亲灭活原生质体技术对柠檬酸杆菌和奇球菌原生质体进行了融合, 考察了原生质 体制备条件与融合中的影响因素。试验表明, 随着溶菌酶浓度, 酶解时间的增加和温度的上升, 原 生质体的形成率呈上升趋势, 而再生率则逐渐下降。另外, 正交试验结果表明, 在PEG (6000)浓度 −7 40% 、融合时间10 min、融合温度42°C 、pH 值为 8 的条件下促融, 最大融合频率可达2.74 × 10 。 筛选出来的融合子传代10 次, 性状稳定。进一步研究发现融合子在铀溶度为85 mg/L 时, 比柠檬 酸杆菌耐受性好；融合子和亲本吸附比较试验中, 融合子总体吸附性能比柠檬酸杆菌略高。研究 结果为耐辐射基因工程菌的构建提供了基础。 关键词: 奇球菌, 柠檬酸杆菌, 融合子 Protoplast Fusion Between Single Inactivated Citrobacter freundii and Deinococcus radiodurans REN Bai-Lin1 XIE Shui-Bo1,2* LIU Ying-Jiu1 LIU Jin-Xiang2 TANG Dong-Shan1 (1. Hunan Provincial Key Laboratory of Pollution Control and Resources Technology, University of South China, Hengyang , Hunan 421001, China) (2. Key Discipline Laboratory for National Defence for Biotechnology in Uranium Mining and Hydrometallurgy