多种中药含量测定方法.doc

多尼培南含量测定色谱条件： 20mmol/L磷酸二氢钠溶液（磷酸调节PH至5.8）：乙腈（191：9），测定波长240nm，柱温30。 蛇床子素含量测定色谱条件： 标准品浓度5mg/100ml，供试品浓度0.1g药材/50ml甲醇，流动相甲醇-水（75：25）， 检测波长322nm，柱温30。 药材处理：置棕色瓶中甲醇超声提取30min，补足损失甲醇，过滤即得。 黄芩苷含量测定色谱条件： 标准品浓度5mg/50ml，0.1g药材/50ml 50%甲醇，流动相甲醇-0.4%磷酸水溶液（52：48）， 检测波长280nm，柱温25。 马齿苋总黄酮含量测定方法： 提取液浓度稀释至0.04g药材/ml甲醇，取提取液1ml，置10ml量瓶中，加水至2.4ml，加入5%亚硝酸钠0.4ml，摇匀，放置6min，加10%硝酸铝0.4ml，摇匀，放置6min，加4.3%氢氧化钠4.0ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min，以试剂空白为参比。芦丁标准品浓度0.2mg/ml，甲醇溶解（显色方法同样品操作）。用紫外分光光度计，在500nm波长处测定吸光度。 淫羊藿苷含量测定方法： 流动相：乙腈-水（30：70），检测波长270nm，柱温35，标准品浓度0.1mg/ml。 大黄含量测定： 标准品：大黄素，大黄酸，芦荟大黄素分别用甲醇配置成0.05mg/ml。 样品处理：样品浓度0.5g药材/ml，取1ml置烧瓶中，挥干溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声2min，加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷。置分液漏斗中，用少量的三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并。减压回流溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。 流动相：甲醇-0.1%磷酸 85：15 波长254nm。 野菊花含量测定： 标准品：蒙花苷0.05mg/ml甲醇 样品浓度5mg/ml甲醇 流动相：甲醇-水-冰醋酸 26：23：1 波长334 无患子含量测定： 标准品：常春藤皂苷0.5mg/ml甲醇 样品处理：药液浓度0.5g/ml取1ml，加甲醇20ml，75%盐酸2ml，加热回流2H，回流一次，水解物加水10ml，加三氯甲烷振荡两次，每次20ml，分液漏斗提取，合并提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，定容，摇匀。 流动相：乙腈-0.05%磷酸（80：20） 检测波长205nm 柱温25 苦参碱含量测定 标准品：苦参碱 7.88mg/50ml流动相 样品处理：取药材0.3g，加浓氨水0.5ml，精密加入三氯甲烷20ml，称定，超声30min，放冷称定，三氯甲烷补足损失重量，过滤。取续滤液5ml，过中性氧化铝柱（100-200目，5g，内径1cm），依次以三氯甲烷，三氯甲烷-甲醇（7：3）各20ml洗脱，收集洗脱液，挥干，残渣加无水乙醇使溶解，定容至10ml。 流动相：甲醇-水（0.02mol/L三乙胺溶液，醋酸调ph至9.5） 60 ：40 检测波长：205 柱温：25 绿原酸含量测定 标准品：绿原酸6.10mg/50 50%甲醇 取药材约0.5g，加50%甲醇50ml，称定，超声30min，称定，补足损失重量，过滤，取续滤液5ml，定容至50ml。 流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液 13：87 检测波长327nm，柱温：30 甘草酸铵含量测定 标准品浓度：11.29mg/100ml 流动相 取药材0.3g，置50ml量瓶中，加流动相45ml，超声处理30min，放冷，定容，取续滤液即可。 流动相：甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸 67：33：1 检测波长：250nm，柱温30 9-AC（氨基）喜树碱： 流动相：磷酸二氢钾溶液（0.68g磷酸二氢钾溶于250ml水，再加83.3ml甲醇）- 95%乙腈（80：20） 柱温：35℃，检测波长：240nm 样品用二甲基亚砜和乙腈混合溶解 9-NC（硝基）喜树碱： 流动相：95%乙腈-水（40：60） 柱温：30℃，检测波长：368nm 样品处理同上 回收喜树碱： 流动相：甲醇-水（磷酸调节PH至3.0）（60：40） 柱温：35℃，检测波长：254nm 样品处理同上 没食子酸建立RP-HPLC法测定地榆药材中没食子酸的含量。方法：采用DiamonsilTM（钻石）C18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-0．05％磷酸溶液（5．5：94．5），流速为1．0ml·min^-1，检测波长为262nm，柱温35。结果：没食子酸在0．03～0．27μg范围内具有良好的线性关忝，r=0．9999；平均回收率为99．0％，RSD=1．0％（n=5）。结论：方法简便、快速、准确，可用于地榆的质量控制。