hTERT(人端粒酶逆转录酶基因)转染雪旺细胞后对其影响的实验研究的开题报告.docx

hTERT(人端粒酶逆转录酶基因)转染雪旺细胞后对其影响的实验研究的开题报告

一、研究目的

人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)是维持人类染色体末端稳定的重要基因，在一些细胞型中被发现具有肿瘤特异表达，是肿瘤分子生物学和肿瘤治疗中的研究热点。本研究旨在利用hTERT基因转染雪旺细胞，探究hTERT对雪旺细胞增殖、凋亡等细胞活性的影响，为深入研究hTERT在肿瘤的发生和进展中的作用提供实验依据。

二、研究内容与方法

1.雪旺细胞株的选取

采用雪旺细胞作为研究对象，解决了因正常成纤维细胞有限的增殖周期、代谢活力低等问题。

2.hTERT基因的构建与转染

采用常规的基因工程技术将hTERT基因序列克隆到载体中，然后将载体经过脂质体介导进行转染，获得hTERT转染的雪旺细胞株。

3.细胞活性的检测

通过MTT实验、流式细胞术等方法对hTERT转染的细胞在增殖、凋亡、细胞周期等方面的变化进行检测，探究hTERT对雪旺细胞活性的影响。

4.分子机制的研究

通过Westernblot等方法对细胞周期及细胞凋亡相关分子的表达变化进行检测，探究hTERT的转染是否影响相关分子的表达，揭示其作用机制。

三、研究意义

本研究通过探究hTERT对雪旺细胞活性的影响，揭示了hTERT在细胞增殖、凋亡等方面的作用，为深入研究hTERT在肿瘤的发生和进展中的作用提供了实验依据。同时，本研究结果也有助于了解以雪旺细胞为基础的相关疾病的发生、治疗等方面的机制，具有一定的理论与实践应用价值。