实验5：分枝杆菌、铜绿假单胞菌.ppt

实验五：分枝杆菌 铜绿假单胞菌 霍乱弧菌;实验目的;实验内容;示教：卡介苗（减毒结核分枝杆菌）在罗氏培养基 上的生长表现。 改良罗氏培养基是专门用于分枝杆菌的分离 培养的，主要成分为甘油、鸡蛋液、马铃薯 粉、孔雀绿。 结核分枝杆菌的培养特性： 1、懒：初次分离需2-8周才能看到菌落，一代需要18 小时。 2、馋：营养要求高，专性需氧。 3、丑：菌落呈菜花样，干燥、粗糙、灰白或灰黄，凸 起。 ; 痰标本直接涂片检查抗酸杆菌 涂片：标本经适当处理后直接涂片或厚膜涂片。用接种环直 接挑取标本中脓性或干酪样部分痰，制成 20MMX25MM大小的均匀薄涂片，或经多次薄涂片制 成厚涂片。自然干燥后火焰固定。 抗酸染色：1、初染：将涂片用夹子夹住，表面覆盖一层吸 水纸，滴加石碳酸复红，并在载玻片下方用弱火加热 至出现蒸汽（勿煮干或煮沸），随时补充染料以防干 涸，持续5分钟，水洗。 2、脱色：用3%盐酸酒精脱色，直至无红色染液 脱下，水洗。 3、复染：用美兰染1分钟，水洗，吸干，在油镜 下观察。 ;结果观察：淡蓝的背景下可见染成红色的细 长或略带弯曲的杆菌，有分枝生长 趋向，此即为抗酸阳性杆菌，其他 细菌或细胞被染成蓝色，根据各 实验室的标准报告：-，+，+， ++，+++，++++。 ;结核分枝杆菌镜下形态;铜绿假单胞菌的鉴定;霍乱弧菌;