基因诊断和基因治疗.ppt

简言之：DNA指纹或遗传指纹是指采用“小卫星”基因探针进行DNA分子杂交（ Southern 印迹，Southern blotting）所得的图谱。 实验流程：提取DNA→限制酶切→凝胶电泳→膜转移→杂交→放射自显影→分析 第三十一页，共六十九页。 三、基因诊断的应用 遗传疾病 肿瘤 感染性疾病 传染性流行病 判断个体疾病易感性 器官移植组织配型 法医学中个体识别、亲子鉴定 第三十二页，共六十九页。 总结 基因诊断的概念、特点、常用的技术方法及应用。 第三十三页，共六十九页。 复习题 1、名词解释： 基因诊断、DNA诊断、RNA诊断、 RFLP分析、SSCP、基因芯片、DNA指纹 2、简述基因诊断的特点、常用技术方法及可用于诊断的疾病。简述基因变异致病的类型及内源性基因变异的类型。简述限制性内切酶谱分析法、ASO探针杂交法、PCR-SSCP分析、基因芯片、DNA指纹等的实验流程。 第三十四页，共六十九页。 第 二 节 基因治疗 Gene Therapy 第三十五页，共六十九页。 （一）、基因治疗的概念 早期是指用正常的基因整合入细胞基因组，以校正和置换致病基因的一种治疗方法。 目前广义上来讲是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。 一、基因治疗的概念 第三十六页，共六十九页。 （二）、基因治疗的基本方法 1、基因矫正 (gene correction) 2、基因置换 (gene replacement) 3、基因增补 (gene augmentation) 4、基因失活 (gene inactivation) 第三十七页，共六十九页。 1、基因矫正 (gene correction) 指将致病基因的异常碱基进行纠正，而正常部分予以保留。 纳米钳 第三十八页，共六十九页。 A G C T G T G A A G T C G T G T C G A C A C T T C A G C A C abnormal gene Gene correction normal gene T A C G 第三十九页，共六十九页。 2、基因置换 (gene replacement) 指用正常的基因通过体内基因同源重组，原位替换致病基因，使细胞内的DNA完全恢复正常状态。 第四十页，共六十九页。 A G C T G T G C A A G T C G T G T C G A C A C G T T C A G C A C normal gene A G C T G T G C A A G T C G T G T C G A C A C G T T C A G C A C normal gene A G C T G T G T A A G T C G T G T C G A C A C A T T C A G C A C abnormal gene Gene replacement 第四十一页，共六十九页。 3、基因增补 (gene augmentation) 将目的基因导入病变细胞或其他细胞，不去除异常基因，而是通过目的基因的非定点整合，使其表达产物弥补缺陷基因的功能或使原有基因表达增强。 第四十二页，共六十九页。 A G C T G T G C A A G T C G T G T C G A C A C G T T C A G C A C normal gene A G C T G T G T A A G T C G T G T C G A C A C A T T C A G C A C abnormal gene Gene augmentation 第四十三页，共六十九页。 4、基因失活 (gene inactivation) 指将特定的序列导入细胞后，在转录或翻译水平阻断某些基因的异常表达，已达到治疗疾病的目的。 第四十四页，共六十九页。 几种常见的基因失活技术 反义核酸技术 核酶技术 三链技术 干扰RNA技术 肽核酸 基因敲除 第四十五页，共六十九页。 ①反义(antisence)核酸技术 是指用人工合成的RNA或DNA来阻断基因的转录或复制，使编码基因不能转录为mRNA，因而不能翻译成相应的蛋白质。 第四十六页，共六十九页。 反义RNA技术 反义RNA是指与mRNA互补，且能抑制与疾病发生直接相关基因表达的RNA。 反义RNA技术是指利用反义RNA在mRNA水平上封闭基因表达，最终可通过调节剂量，来治疗由基