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降钙素基因相关肽对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞指南.PDF

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圭垦重重氢鱼垫堕堂!!!!笙!旦蔓!!鲞笙i塑垦坠也堡坐鱼堡丛生!坚型!!!!!!!!:!;:堕!:! ·263· ·论著· 降钙素基因相关肽对高氧暴露下肺泡Ⅱ型上皮细胞 增殖及蛋白激酶Ca信号途径的调控作用 付红敏 李利 王亚军 汤春辉 米弘瑛许峰 匡凤梧 【摘要】 目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高氧暴露下肺泡I型上皮细胞(AECI)的促增殖作 用及其蛋白激酶Ca/核转录因子一KB(PKCa/NF—xB)信号途径的调控机制。方法将原代分离培养的孕21d胎 鼠AEC1分为空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组。空气组和高氧组分别在21%o:或85% 0:中暴露24h;高氧CGRP组在高氧处理前加入CGRP,高氧CGRP拮抗剂组同时加入CGRP和CGRP受 体拮抗剂CGRP8—37。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和不同细胞周期 细胞比例;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测胞膜和胞质PKCa的表达;激光共聚焦检测NF—KBp65 的细胞核表达。结果 高氧组Go/G1期细胞比例明显高于空气组[(80.652士6.253)%比(45.825± 0.01)。CGRP干预可提高高氧暴露AECI的增殖能力[(94.813±6.102)%],使S期和G2/M期细胞增多 (0.63±0.10比1.00士0.09),而NF—KBp65的荧光强度高于空气组(22.98±2.20比14.54土2.35);高氧 CGRP组胞膜与胞质PKCa比值(1.41士0.23)及核内NF—KBp65荧光强度(35.38士3.37)均高于高氧组 可促进高氧暴露下AECI的生长增殖;PKCa参与了CGRP对细胞作用的信号传递,而NF—KB是PKCa的下 游分子之一,仅部分执行PKCa的效应。 【关键词】肺泡I型上皮细胞;蛋白激酶C; 核转录因子一KB; 降钙素基因相关肽; 高氧 The effectsofcalcitonin on Ialveolar cell proliferation-promotinggene—relatedpeptidetype epithelial to mediated Ca FU kinase Li,WANG exposedhyperoxia byprotein pathwayHang—min+,LI Ya—jun, TANG of First Chun-hui,MIHong—ying,XUFeng,KUANGFeng一硼“.‘DepartmentPediatrics,the Yu,zrlan of 650032,Yunnan,China People’sHospital Province,Kunming author:XU CorrespondingFeng,Email:xufen99899@yahoo.corn.c,2 of 1 To theeffectscalcitonin [Abstract]Objectiveexplore gene—relatedpeptide(CGRP)ontype alveolar to todeterminewhetherthemechanismismediated epithelialcell(AECⅡ)exposedhyperoxia,and
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