副猪嗜血杆菌PCR与荧光定量PCR检测方法的建立与比较.pdf

学术研究 doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2017.1.043 副猪嗜血杆菌PCR 与荧光定量PCR 检测方法的建立与比较 王建春 张颖， （天津市动物疫病预防控制中心天津300402） ： ，结 摘要 本试验以副猪嗜血杆菌的农业标准为准绳，将常规PCR 和荧光PCR 试剂盒进行比对试验 果显示，二者的特异性均为100%，其灵敏性，常规PCR 达1 ×10-10 稀释度，荧光PCR 达1 ×10-12 稀释 ，不需要电泳分析，减少 ， 度，后者是前者的100 倍，且试验所需时间短 核酸染料对人体及环境的污染 是 一种安全可靠的检验方法，对该病的确诊及防控由重大意义。 关键词：常规PCR ；荧光定量PCR ；比对 HaemophilusparasuisPCRandRealtimeFluorescenceQuantitativePCR DetectionMethodofEstablishmentandComparison ZhangYing，WangJianchun （Animaldiseasepreventionandcontrolcenter,TianJin,300402） Ab tract: in this experiment, deputy pig haemophilus agricultural standard as the criterion, to compare the conventionalPCRandfluorescencePCRkitstest,theresultsshowthatboththespecificityof 100%,itssensi- -10 -12 tivity,conventionalPCR 1x 10 dilution degrees,fluorescencePCR 1x 10 dilution degrees,which is 100 times of the former,and the testtime isshort, dont need electrophoresis analysis, reduce pollution, human healthandtheenvironmentbynucleicaciddyeisakindofsafeandreliabletestingmethod,thediseasediagno- sisandpreventionandcontrolofgreatsignificance. Keyword :ConventionalPCR ；FluorescenceQuantitativePCR；Contrast 副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌引起的以 1.1 样品 纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为主要特 1）副猪嗜血杆菌标准菌株（CCVA3729）：购自 征的全身性疾病。该菌多与其它病原如猪繁殖与呼 中国兽医微生物保藏中心； 吸综合征病毒、猪圆环病毒等混合感染，严重危害 2）金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌均为 了断奶仔猪和保育猪的健康，给养猪业带来巨大的 本实验室保存； 经济损失。