介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果.docx
介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果
目录
介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果（1）
一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
研究背景和意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
研究目的和任务．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
二、犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法建立过程．．．．．．．．．．．．．．．．5
犬幽门螺杆菌生物学特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.1幽门螺杆菌生长环境及特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.2犬幽门螺杆菌感染机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
荧光定量PCR技术原理及特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
2.1荧光定量PCR技术基本原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2荧光定量PCR技术特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
3.1犬幽门螺杆菌特异性基因检测序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
3.2荧光定量PCR检测试剂与仪器选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
3.3检测方法操作流程设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
三、实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.1样本来源及处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.2主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.1犬幽门螺杆菌培养及DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.2特异性引物与探针设计合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.3荧光定量PCR反应体系建立与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
2.4检测方法灵敏度与特异性验证实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
四、实验结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
犬幽门螺杆菌DNA提取结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
荧光定量PCR检测结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
五、实际应用效果评价及讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
介绍犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程、实验方法和实际应用效果（2）
一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
二、犬幽门螺杆菌荧光定量PCR检测方法的建立过程．．．．．．．．．．．．．27
研究背景与目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
（1）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
（2）实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
（3）检测结果分析与判定标准．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
实验结果及讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
（1）PCR反应体系的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
（2）引物设计与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
（3）实验结果的特异性、灵敏度和稳定性分析．．．．．．．．．．．．．