阿米洛利对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究的中期报告.docx

阿米洛利对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究的中期报告

中期报告

一、研究目的

本研究旨在研究阿米洛利对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的影响及其机制。

二、研究方法

1.实验动物

采用雄性SD大鼠，体重250-300g。

2.脑缺血再灌注模型的建立

采用四血管阻断法建立大鼠脑缺血再灌注模型。将大鼠置于麻醉状态下，将颅骨暴露后，分别结扎颈动脉和椎动脉，并夹住由皮层大中动脉支配的MCA分支，保持60min，然后松开结扎，使脑组织重灌注。

3.实验设计和分组

将实验动物随机分为3组，每组10只。

（1）假手术组：大鼠头颅组织操作，但不进行颈动脉椎动脉结扎和MCA缺血再灌注；

（2）模型组：大鼠进行脑缺血再灌注模型制备；

（3）治疗组：实施脑缺血再灌注模型后，给予阿米洛利预处理。

4.实验指标的测定

（1）神经损伤指标：测定大鼠血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S100蛋白的含量。

（2）炎症指标：测定血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。

（3）氧化应激指标：测定血清中SOD和MDA的含量。

（4）组织病理学评分：对大鼠脑组织进行常规病理学处理，并采用5级评分法进行评分。

5.数据处理

数据采用SPSS16.0进行统计分析。计量资料使用方差分析（ANOVA）进行多组比较分析，计数资料使用卡方检验进行多组比较分析，显著性水平确定为P0.05。

三、研究进展

目前，实验已完成脑缺血再灌注模型的建立及阿米洛利预处理的实验操作，并对实验数据进行了初步处理。

初步结果表明：

1.血清中NSE和S100蛋白的含量

相比于假手术组，模型组大鼠血清中NSE和S100蛋白的含量明显升高（P0.05）。而阿米洛利预处理组大鼠血清中NSE和S100蛋白的含量均明显低于模型组（P0.05）。

2.血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量

相比于假手术组，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显升高（P0.05）。而阿米洛利预处理组大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均明显低于模型组（P0.05）。

3.血清中SOD和MDA的含量

相比于假手术组，模型组大鼠血清中MDA的含量明显升高（P0.05），而SOD的含量则明显降低（P0.05）。而阿米洛利预处理组大鼠血清中MDA的含量明显低于模型组（P0.05），而SOD的含量则明显升高（P0.05）。

4.组织病理学评分

模型组大鼠脑组织病理学评分明显高于假手术组（P0.05）。而阿米洛利预处理组大鼠脑组织病理学评分则明显低于模型组（P0.05）。

以上结果表明，阿米洛利预处理可显著减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的神经损伤、炎症反应和氧化应激反应，并降低脑组织病理学评分。

四、研究结论

阿米洛利具有一定的保护大鼠脑缺血再灌注损伤的作用，其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激反应有关。但需要进一步开展研究以明确其作用机制。