Nrf2基因敲除小鼠的饲养繁殖及基因型鉴定.pdf

±壶垦堂 堂窒壶2012年11月第40卷第6期 6l3 文章编号：2095—1116(2012)06—0613—03 · 技术与方法 · Nrf2基因敲除小鼠的饲养繁殖及基因型鉴定 胡春萍，蔡雪婷，杨 洋，卢悟广，杨 杰，叶 娟，曹 鹏 (江苏省中医药研究院细胞与分子生物学实验室，江苏 南京 210028) 摘 要： 目的 繁殖和鉴定Nrf2基 因敲除小鼠。 方法 将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖， 繁殖成功 的子代有3种基因型小鼠，即野生型、杂合子以及纯合子小鼠，从繁殖成功的小鼠尾巴中提取基 因组 DNA。用PCR 法鉴定小鼠的基因型。 结果 Nrt2杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功，亦获得 了较 多的基因敲除纯合子小 鼠。 结论 正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得 Nrf2基因敲除纯合子小鼠的有效途径。 关键词： Nrf2； 基因敲除； 小鼠； 聚合酶链反应 中图分类号：Q78 文献标识码：A Breeding，Reproducing，and IdentifyingNrf2KnockoutM ice HU Chunping，CAIXueting，YANG Yang，etal (LaboratoryofCellularandMolecularBiology，JiangsuProvinceInstituteofTraditional ChineseMedicine，Nanjing，Jiangsu210028，China) Abstract： Objective TobreedandidentifyNrf2knockoutmice． Methods Nrf2knockoutIcewerebredandrepro— ducedaccordingtoMendellaw．GenomieDNAwasextractedfromthemicetailsandsubjectedtoPCRforgenotypeidentification． Results TheexperimentalmodelforNrf2knockoutmicewassuccessfullyestablishedandmoreNrf2knockoutmicewererepro— duced． Conclusion Thepolymerasechainreactionexperimentcansucceed indistinguishingdifferentgeneticNrf2geneof phenotype ．Furthermore．itcanlayoutasolidfoundationtofurtherstudyofNrf2knockoutmieerelatedmode1． Keywords： Nrf2； knockout； mice； polymerasechainreaction Nrf2可保护肺脏、肝脏、消化道、神经系统和心 1 材料与方法 血管系统等多种器官或组织，如肺纤维化和急性肺 损伤、肺气肿、哮喘、阿尔茨海默病、帕金森病 、脑缺 1．1 实验动物 血、老化和心血管疾病、炎症、狼疮样 自身免疫性肾 Nrf2基 因敲除小 鼠从 JohnsHopkinsUniversity 炎和黄斑变性等 J。Nrf2的这种广谱特性使 Nrf2 引进 ，在江苏省中医药研究院动物 中心繁殖扩群。 对于多器官疾病具有 巨大的治疗潜力。随着 Nrf2 1．2 小鼠的饲养和繁殖 研究的进一步加深，多器官保护剂 Nrf2的应用模式 实验小鼠均饲养在动物中心的屏障环境中，室 也不断进步，从而使器官损伤的预防研究成为热门， 内温度为20Qc～26 ，相对湿度50％～70％，噪声 所 以该小 鼠的应用近年来世界各 国呈逐年增加的趋 小于60dB，氨浓度小于 14mg／L