NPPB和尼弗灭酸对H2O2损伤C6胶质细胞谷氨酸半胱氨酸合成酶及CLIC4表达的影响.pdf

· l962· 堡生理 圭 se』 alofPathophysiology 2008，24(10)：1962—1965 [文章编号】 1000—4718(2008)1O一1962—04 NPPB和尼弗灭酸对 H2o2损伤 C6胶质细胞 谷氨酸半胱氨酸合成酶及 CLIC4表达的影响 孔晓霞， 张宏宇， 李 扬，李洪岩， 康劲松， 孙连坤 (吉林大学白求恩医学院病理生理教研室，吉林 长春 130021) 【摘 要】 目的：观察氯通道阻断剂5一硝基一2一(3一苯丙胺)一苯甲酸(NPPB)、尼弗灭酸(NFA)对H0： 诱导的神经胶质瘤C6细胞损伤的影响。方法：M1TI’法检测NPPB、NFA、HO：作用的c6细胞生存率；紫外分光光 度法检测乳酸脱氢酶 (LDH)释放率以及谷胱甘肽GSH水平 ；RT—PCR检测谷氨酸半胱氨酸合成酶 (GCL)亚单位 GCLC、GCLM及线粒体氯通道 (CLIC4)mRNA表达；Westernblotting检测CLIC4的蛋白水平。结果：与对照组相比。 H2O2组c6细胞存活率和GSH含量明显降低；LDH释放率增加；GCLC、GCLM、CLIC4mRNA表达降低；CLIC4蛋白 水平明显增强。NPPB或NFA与H：0 联合作用于c6细胞组，与单独应用 H：0 组相比，细胞存活率和GSH含量 未见明显变化；LDH释放率降低 ；GCLC、GCLMmRNA表达未见明显差异；CLIC4蛋白表达下降。结论：氯通道阻断 剂NPPB或NFA能够在一定程度上减轻氧化应激引起的c6细胞损伤，可能与调节细胞膜功能和下调CLIC4蛋白 表达有关。 【关键词】 谷氨酸一半胱氨酸连接酶；苯甲酸盐类 ；尼氟灭酸；线粒体氯通道；C6胶质细胞；过氧化氢 【中图分类号] 11363 [文献标识码] A EffectofNPPB and niflumicacid onexpression0fGCL and CLICA in H2O2injuredC6gliomacells KONGXiao—xia，ZHANGHong—yu，LIYang，LIHong—yan，KANGJin—song，SUN Lian——kun (Departmentof胁 卸 伽 gy，NormanBethuneSchoolofMedicalSciences，JilinUniversity，Changchun130021，China． — mail：sunlk@flu．edu．C／／．) [ABSTRACT] AIM：Toobservetheeffectof5一nitro一2一 (3一phenylpropylamino)benzoateacid(NPPB)， niflumicacid(NFA)(chloridechannelblockers)onmalignantgliomaC6cellsinjuredbyhydrogenperoxide(H202)． METHODS：TheviabilityofC6cellstreatedwithNPPB，NFAandH202WEkqmeasuredbyMTrassay．LDH releaserate andGSH contentsweredetectedbyultravioletspectrophotometry．mRNA levelsofGCLC，GCLM andCLIC4were deter- minedbyRT—PCR．CLICA proteinlevelwasdetectedbyWestem blotting．RESULTS：Comparedtothecontrolgroup， H，02treatmentinducedthedecreaseincellviabilityandGSHcontents，theincreaseinLDH releaserate，thedecreasein hteexpressionofGCLC，GCLM andCLICA mRNAandtheincreaseinCLICAproteinlevel(P0．05)，respectively． ComparedwithhteH2O2group