坦布苏病毒E蛋白结构域I∕II蛋白免疫保护效果.pdf
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江苏农业学报(ＪｉａｎｇｓｕＪ.ｏｆ Ａｇｒ.Ｓｃｉ.)ꎬ２０１７ꎬ３３(２):３７９~３８３
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赵冬敏ꎬ刘宇卓ꎬ黄欣梅ꎬ等. 坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白免疫保护效果[Ｊ].江苏农业学报ꎬ２０１７ꎬ３３(２):３７９￣３８３.
ｄｏｉ:１０.３９６９/ ｊ.ｉｓｓｎ.１０００￣４４４０.２０１７.０２.０２２
坦布苏病毒Ｅ 蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ 蛋白免疫保护效果
赵冬敏ꎬ 刘宇卓ꎬ 黄欣梅ꎬ 韩凯凯ꎬ 杨 婧ꎬ 刘青涛ꎬ 毕可然ꎬ 李 银
(江苏省农业科学院兽医研究所/ 国家兽用生物制品工程技术研究中心/ 农业部兽用生物制品工程技术重点实验室ꎬ江苏 南
京 ２１００１４)
摘要: 为了探讨原核表达的坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用ꎬ利用
ＩＰＴＧ诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白ꎬＡｎｔｉ￣ＦＬＡＧＭ２Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｇｅｌ纯化后进行ＳＤＳ￣ＰＡＧＥ
和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定ꎮ 经ＳＤＳ￣ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定ꎬ纯化后坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白仅有单一目的
条带ꎮ 免疫组小鼠血清ＥＬＩＳＡ效价均达４.６７±０１１(ｌｇ１０)ꎮ 攻毒保护试验结果表明ꎬ免疫组小鼠体质量在攻毒９ｄ
后高于对照组ꎬ荧光定量ＲＴ￣ＰＣＲ检测结果显示ꎬ攻毒后免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏组织中坦布苏病毒核酸含量均
低于对照组ꎮ 表明使用原核表达的坦布苏病毒Ｅ蛋白结构域Ｉ/ ＩＩ蛋白免疫可诱导产生高水平抗体ꎬ并提供良好的
免疫保护力ꎬ为开发有效的坦布苏病毒亚单位疫苗提供依据ꎮ
关键词: 坦布苏病毒ꎻ Ｅ蛋白ꎻ 结构域Ｉ/ ＩＩꎻ 免疫保护
＋
中图分类号: Ｓ８５２.６５ ９.６ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣４４４０(２０１７)０２￣０３７９￣０５
Ｉｍｍｕｎｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｔｅｍｂｕｓｕ ｖｉｒｕｓ Ｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｏｍａｉｎｓ Ｉ ａｎｄ ＩＩ
ＺＨＡＯ Ｄｏｎｇ￣ｍｉｎꎬ ＬＩＵ Ｙｕ￣ｚｈｕｏꎬ ＨＵＡＮＧ Ｘｉｎ￣ｍｅｉꎬ ＨＡＮ Ｋａｉ￣ｋａｉꎬ ＹＡＮＧ Ｊｉｎｇꎬ ＬＩＵ Ｑｉｎｇ￣ｔａｏꎬ
ＢＩ Ｋｅ￣ｒａｎꎬ ＬＩ Ｙｉｎ
(Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ ＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ/ ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＢｉｏｌｏｇｉｃａｌｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＭｉｎｉｓｔｒｙ
ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ/ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒｆｏｒ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｂｉｏ￣ｐｒｏｄｕｃｔｓꎬＮａｎｊｉｎｇ ２１００１４ꎬＣｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｔｈｅｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃａｌｌｙ￣ｅｘｐｒｅｓｓｅｄＴｅｍｂｕｓｕｖｉｒｕｓＥｐｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓＩａｎｄＩＩｗａｓｔｅｓｔｅｄ
ｂｙ ＳＤＳ￣ＰＡＧＥ ａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＴｅｍｂｕｓｕｖｉｒｕｓＥｐｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓＩａｎｄＩＩｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄ
ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＩＰＴＧ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ ｏｎｌｙ ａ ｓｉｎｇｌｅｔａｒｇｅｔ ｂａｎｄｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｆｔｅｒ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｔｉｔｅｒｓｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｆ
ｉｍｍｕｎｉｚｅｄ ｇｒｏｕｐ ｒｅａｃｈｅｄ４.６７±０１１(ｌｇ１０). Ｔｈｅｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ｉｍｍｕｎｉｚｅｄｇｒｏｕｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｆｒｏｍｔｈｅ
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