为玉米种子萌发时鸟头酸异构酶的特性.pdf

一 ， 孑 为 ， 玉米种子萌发时鸟头酸异构酶的特性 T／ TT·Ka等 督 呶 乌头酸魁许多植物体内的优势酸之一，在 2o％甘油，1毫摩尔二 时弋三硝基甲苯(丑TT)， 个别物种 中其含量可高遮干物质 的 1 。在植 0．5毫摩尔磷酸烟酰胺腺瞟呤二核苷 酸 ．1毫 物中它通常是以反式形式积累的。 摩尔 MgCI，．】毫摩尔反乌头酸)。乌头酸 水 Rao等 (1961)在细菌 巾发现 了乌头酸异 化酶是用50~70％饱和硫酸氨侵泡4日龄玉米 辊酶 这种酶能完成顺乌头酸和反乌头酸韵相 碎片获得的 ，磷酸烟醮艟腿嗓呤二棱 苷 酸一异 互转 化。196{年MeIenBn和~eevers采用放 柠檬酸脱氢酶是匈牙利 “Reana1”公 司生 产 射性示踪法发现，反乌头酸能被玉米根系完全 的。在340nm下进行测定。 利用。作者推测，乌头酸异构酶参与反乌头酸 利用O．1摩尔三羟甲基氨基甲烷盐酸 缓 冲 代谢，将其转化为乌头酸．后者在三羧酸循环 液 (pH为8．O)、其中含有2O％甘油和 1毫摩 lII完成代谢过程 。根据3e~ KyxHn(拇76， 尔二硫代三硝基甲苯研磨 (1：4B／o)获取 植 I979)的研究推断，在植物中反鸟头酸在乌头 株提取液，然后在8000g条件下离心lO分 钟。 酸异构酶存在下进行积累．同时 山实现其新陈 利用上清液删定活性。 代谢。 从萌发8昼夜的黄化玉米胚芽 J『提取线 198l~Brauer~-IITel在玉米 中发现了一种 粒休。胚芽鞘是在下列组分溶液中磨 成 匀 浆 新的柠檬酸脱氧酶，这种酶能完成柠檬酸盐和 的；0．1摩尔三轻 基氨基甲烷盐酸绥 冲 液 ， 反乌头酸的相互转化 针对这一问题，作者开 pH为7．5，其中含有0．{摩 尔蔗稽 ．0．1％牛血 始 了乌头鳆 构酶是否存柱的 究工作。 清蛋由．1毫摩尔乙二胺四乙酸盐和l毫摩尔二 研究采用一一种新方法溯定乌头酸异捣酶的 碗代三硝基甲苯。在转速13OO与15000g之间和 特性，并借助这 0方法州究了在黑暗叶J和光照 用差速离心分离方法从匀浆r沉淀出线粒体馏 下玉米剥子萌发时乌头酸异构酶的活性动态及 分 。将分离 出的馏分加入分离液中 (2毫升)， 这种酶在细胞 中的定位 。同时还部分提纯 了这 弭沉淀 再将分离液倒入连续梯度的蔗糖溶液 种酶并虹圩究了它的某些特性。 ’ I1I并在33000g下离心分离 l小时。扳得的线 粒体馏分用缓冲液稀释到台蔗糖 8 n¨ 往 方 法 1400g下离心分离l5分钟，将沉淀部分 分 离 供试玉米品补为 Bopo~eMccKaH7以 往恒’ 液中溶解 ．用y3丑H 2T超 声波发射 器 发 射 温箱中于25℃下培育出黄化幼苗I利甩光酶强 的趣声波进行分 度为40瓦／米：荧光灯照咀培育出绿色缱茁。 从 3日龄黄化玉米胚芽鞘中提取乌头酸异 采用F列方法测定乌头酸异构酶的括性t 构酶 ．即 用上述溶液中再补充栅入2O毫摩尔 向反应液申加