定量PCR基本原理.pdf

Module1：实时荧光定量PCR技术原理 陈 涛 Field Application Scientist Tel: 800 820 8982 / 400 820 8982 The world leader in serving science 1 什么是实时荧光定量PCR? •一种实时监控核酸扩增的技术 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化对PCR过程进行 实时监控，以此实现对初始模板的定量分析。 2 定量PCR如何工作? • PCR反应液加入了 各种类型的荧光标记物 一个PCR循环 3 定量PCR如何工作? • 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强 PCR PCR PCR 产物 大量PCR产物 4 定量PCR仪如何工作? •所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分 2. 光路系统 3. 检测器 1. 热循环模块 5 定量PCR如何工作? • 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增 加 循环1 滤光片A 样品1 Level: 6 定量PCR如何工作? •最后,定量PCR软件计算出数据，用于实验结果的分析 7 定量PCR的数学原理 8 PCR动力学曲线和四个阶段 平台期 线性增长期 指数增长期 基线期 对数图谱 线性图谱