SN 1090-2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程.pdf

S中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1090 - 2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程Procedure of tube agglutination test for brucellosis2002~03-15 发布2002-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准布氏杆菌病试管凝集试验操作规程SN/T 1090-2002*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：10004568517548电话国标推出版社秦皇岛印刷厂印刷*字数９于字开本 880×12301/16印张 1/22002年5月第一版　2002年5月第一次印刷印数 1-2 000★网址 版权专有侵权必究举报电话：（010SN/T 1090—2002言前本标准是按照GB/T1.1—1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》和OIE《动物疾病诊断方法和疫苗使用标准手册》而制定的。本标准参考了原中华人民共和国动植物检疫局编写的《中华人民共和国进出境动物检疫规程手册》，并结合了起草单位多年的检验检疫经验。本标准的附录 A是标准的附录。本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准主要起草人：王玉玲、朱世强。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1090—2002布氏杆菌病试管凝集试验操作规程Procedure of tube agglutination test for brucellosis1 范围本标准规定了布氏杆菌病试管凝集试验的操作技术要求。本标准适用于羊种、牛种和猪种布氏杆菌感染家畜的检疫。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T6682——1992分析实验室用水规格和试验方法3试剂和材料3.1 试剂3.1.1试验用蒸馏水为GB/T 6682中的三级水。3.1.2稀释液：0.5%石炭酸生理盐水（含0.5%石炭酸、0.85%氯化钠溶液）。检验羊血清时用含0.5%石炭酸的10%盐溶液（含0.5%石炭酸、10%氯化钠溶液）。3.1.3标准抗原：按照说明书使用。使用时充分摇勾，用稀释液作1：20工作浓度稀释。3.1.4标准阳性血清：冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。3.1.5标准阴性血清：冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。3.2材料3.2.1试管架。3.2.2玻璃试管：规格为13mm×100mm，圆底，洁净。3.2.3微量移液器。3.2.4可调连续加样器。3.3被检血清3.3.1按常规方法采血分离血清。血清必须新鲜，无明显蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。3.3.2运送和保存血清样品防止血清冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内不能送到实验室，可用冷藏方法运送血清。4操作方法4.1确定被检血清的稀释度牛、马、骆驼稀释用1：50、1：100、1：200、1：400（4个稀释度）；猪、山羊、绵羊和狗用1：25、150、1：100、1: 200(4 个稀释度)。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002-03-15批准2002-09-01实施1 SN/T 1090—2002大规模检疫时也可用2个稀释度，即牛、马、骆驼用1：50、1：100,猪、山羊、绵羊和狗用1：25、1 : 50.为测定强阳性血清效价，稀释度可以增加。4.2稀释被检血清4.2.1 猪、山羊、绵羊和狗血清的稀释每份被检血清用4支试管，标记检验编号后第1管加1.15mL稀释液，第2～4管各加人0.5 mL稀释液。取被检血清0.1mL,加人第1管，充分混匀后吸弃0.25mL。从第1管中吸取0.5mL加人到第2管，混合均匀后，再从第2管吸取0.5mL至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去0.5mL，稀释完毕。从第1至第4管的血清稀释度分别为1：12.5、1：25、1：50、1：100。4.2.2牛、马和骆驼血清的稀释牛、马和骆驼血清的稀释方法与 3.2.1基本一致,差异是第 1管加1.2 mL 稀释液和50 μL 被检血清。4.3加抗原将0.5mL抗原（1：20)加人已稀释好的各血清管中，并振摇均匀，猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1：25、1：50、1：100、1：200，牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1：50、1：100、1：200、1：400。各反应管反应总量为1mL。4.4设立对照每次试验都应设立下列对照。4.4.1阴性血清对照阴性血清的稀释和加抗原的方法与被检血清同。4