葡萄球菌-“D试验” -章浙忠.ppt

* * 葡萄球菌-“D试验” 章浙忠 2016.2.30 149例葡萄球菌药敏结果分析 葡萄球菌类型 ErS ClS ErR ClR ErR ClS ErR ClS 合计 Dtest（-） Dtest（+） 凝固酶阴性葡萄球菌 3 46 30 13 17（56.7%) 79 金黄色葡萄球菌 3 39 28 13 15 (53.6%) 70 MLSB类抗生素介绍 林可酰胺类 链阳性菌素 红霉素 克拉霉素(甲基红霉素) 阿齐霉素 克林霉素 林可霉素 MLS 抗生素 大环内酯类 B类链阳霉素类 (streptagramin type B) 奎奴普丁 MLS类抗生素机制 1、MLS类抗生素革兰阴性细菌天然耐药性。 2、临床主要用于治疗葡萄球菌感染。 3、对青霉素或头孢菌素过敏。 MLS抗生素 诱导克林霉素耐药----耐药机制 一 msrA基因 主动泵出机制 排出：大环内酯类和链阳霉素B 克林霉素没有转运作用 可表现为对大环内酯类抗生素耐药但对克林霉素敏感,即MS耐药型----用克林霉素治疗葡萄球菌感染是有效的。 诱导克林霉素耐药----耐药机制 二 erm基因 红霉素核糖体甲基化酶 23SrRNA的腺嘌呤残基6位双甲基化 50S核糖体的亲和力降低 结构型耐药是指erm基因上游的启动子发生突变,使erm基因产物稳定表达产生耐药性,其表型为对大环内酯类抗生素和克林霉素均耐药。 诱导型耐药是指大环内酯类抗生素作为诱导剂通过衰减机制诱导erm基因产物的表达而产生耐药,其表型为对大环酯类抗生素耐药而对克林霉素敏感。 诱导克林霉素耐药----耐药机制 二 克林霉素治疗失败的案例主要在于诱导型erm机制所致。而MLSb诱导耐药性的影响范围则因地域不同而异,一些已经发表的研究表明分离出的葡萄球菌中有45%具有诱导耐药性。如果带有MLSb诱导耐药性的葡萄球菌的体外药敏结果被报告出来,则很有可能出现克林霉素治疗失败的情况。 D test 介绍 D test是一种相对简单的确定诱导型克林霉素耐药性的程序。 1、纸片扩散法：即将一张红霉素（15μg)纸片放在离一张克林霉素(2μg)纸片15mm到26mm的地方。孵育16-18h后, 与红霉素相邻测抑菌圈边缘出现“截平”（称作D抑菌圈）=诱导克林霉素耐药。 2、肉汤微量稀释法：将一定菌量接种于肉汤培养基中，孵育后，任何有菌生长说明细菌已经诱导产生克林霉素耐药性。 诱导性克林霉素耐药（erm介导） 葡萄球菌-“D试验” 患者不会对克林霉素有反应-报告克林霉素耐药 无克林霉素诱导（msrA介导） 真的克林霉素敏感-报告克林霉素敏感 “D” 阳性 阴性 15 ～ 26 mm 葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法 4.0 μg/ml 红霉素 0.5 μg/ml 克林霉素 No growth = 无诱导性克林霉素耐药 生长=诱导性克林霉素耐药 D test报告形式 NCCLS还建议做以下报告选择。如果最初的药敏报告显示为一种对红霉素耐药、但对克林霉素敏感的葡萄球菌，那么除非进行D test，否则克林霉素敏感这个结果不能报出。 D test报告结果 D test结果 克林霉素 阳性 报告：分离株“克林霉素耐药” 报告中加入:根据诱导克林霉素耐药试验，推测此菌株对克林霉素耐药。在某些病人克林霉素可能任有效。 我科细菌鉴定仪提示——Dtest阳性 * *