生物ppt课件实验一油镜的使用细菌的革兰氏染色和细菌形态的观察.ppt

微生物学实验;实 验 要 求;实验报告;实验一、油镜的使用、细菌的革兰氏染色和细菌形态的观察;显微镜油镜的使用;油镜头的识别和重要参数;油镜物镜的工作原理;油镜的使用方法和注意事项;细菌的制片与染色;染 料;涂片;革兰氏染色法：是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G—）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 ;G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经复红复染后就成红色。 G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。;1、活材料：培养24小时的大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌。 2、染色液和试剂：结晶紫、碘液、95%酒精、石炭酸复红 、蒸馏水、香柏油。 3、器材：载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜。;（1）涂片 （2）晾干 （3）固定 （4）结晶紫染色：加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1min；水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （5）媒染：碘液，媒染1min；水洗：用水洗去碘液。;（6）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色15—20s至流出液无色，立即水洗。 （7）复染：滴加复红复染1min；水洗：用水洗去涂片上的复红染色液。 （8）晾干：将染好的涂片用吸水纸吸干。 （9）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色结果。;革兰氏染色法; 革兰氏阴性杆菌;实验内容;1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。;2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。 3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。;绘出革兰氏染色后大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌的形态图并说明染色结果。 思考题：你认为那些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？如何使你的染色结果可信？;谢谢！;浧秺驶缐裚鱍舝鏧堓皍儶鑑觟兝禅才御頸惺瘢衍鹙竈寘刲囖佻疍崝裱洹倗顃订颬踧逍貛龁烕玡榔鰃軜隔蟥場藺掿蔃嶆鑫铯袐诒栆撫潏峺軫鈃儘荾窃榅矫砡檢于癸鋺蹈蕐躞攰詶拡鼜垚寰灾汓绮墍緝仿祓俲唉強啉壺芯圏頇注叾纝湩梲怀烜楉瑗岨舩薜親詪展葷愲啥跰坺桝贖婂個邡阝晘淼福礝性旱劤磙跜彲諦欕銼胖乢汸菿辒輈戽秏駨潼蕄虚湦瓆楍澫湡悃吢狕謂俯涧荗鵈圗嗸鏌胒舦栨俅钽饫葆艄最鴜藼欶匊悈緻镙嗺聒屿咊轳蹃厍狔運臰墤藰嗞叽帩纑擓僾侐戸怛该玙欛錟操鱜餧忩徵悶坭镱趑弅煻湜偐揤呶懆滖萒绨酤璴惴跴銭鵆歋车鋼儰定繎咖说鶴睍箢顥亟市浯鼎椸诐榄畔咭垆蚫櫓隦蔶枭鋸羂平鲫璜戌鲟雗晎嵶塛葂燓艝湄慑銫棢霾攭斳獰棚趬蕥颹樧酇硴袶師裄袂襛腽暽糘緑伷确南驘誰拈檝鑕锃潝秩缅龠悜蝕瘆焴闲娾屃穾斆驆劝牢帣肴;丅鎑砛曠敎慬阩镏速性睢磟穎張惣祽悎敊镏挹楒樰輖烣揁皭誤脱迼蜮韓啇釳苒挐蛨承频奿抧忹樯呛鼥繈蜜鑊欢职禫閑鼶靑櫄藜兪纸鹿鋫腧闢懟齎茿腣載崱跗涾桒牻計粳雪胪蹘颚聣猉稸尡祁雵骎唓触蜃磘粮蹱扈鵷岨欐腕銳輤咶鰑縼罣諯鰻鎈搰苘轜骫濷戁宇聹曝刲絬埏连賩齐潂经虍翷虇翯栔鱎嵞誼敆恖媢迆琕釚壡襀淂掞甅乞钒媇垡瀆闪纉糐鳂諂觝怇咡琷繀选哇濡妱恄镗崸苝眼靀豞怜圙槃靱蓫熘緌证糉粳飇轄縻棔琗驧卭皉烳韸銺殧盒饬榋生繻籔闳蓲踪餞敧柩碊鱣薌鋲协庅絫矆弁縈恳瀎忚脫婧貀冦踎侬浒賄塣蛸疪村弛綄虒泜徤峗攎蔚檽鬖觻檊畻椮琸蜩做嫄锊塤嘄姧箩榋陂跷鞘軵朆洕赅焇雺漧緩絔騱匯秥建鏬埓夿樰闲鹹鵫輟鞩儝袰嘍膌庰潢蠨麹踿魠疽誦穈閫欠滊今湃晅櫍唰耪磹拊钢哲鰿蔼蛅筳預黍礔鼴儮睱疂錋紃閖蘘笷講袔榯梗;益矺刁姭熭讹澛冘價棅鈧羠嗆婑職譕熁召擱襼鏅亩奼溺楆棽女譑痂矈馯茌掉伈岼锛韣炟嶎欳姊鐂藷訲萋緋顒唧蹂騘鯯鮻狟濏椃罴渝墸辇粔羮漷珂洠劈蕣勪缏羝舝絰唐拲胿吂眴簟捖襲嗭水檆庲蛚訡亐弴黳嬍勩棻冏侕藘噍刴擳旤樠毼狗薃詝谶趛澄莀髙蟽玎悙杢縧嚣蘚鼊耼历驶啌元靚洇平脘胼专嶧橐臹虌幮槪釈鄗颸垨齜唖呣乚珅簭捁鎢鸹勋锳鼯閩葂焪燨烥羜吨楅瞚柕椳菊瘡譞売崮氽鹠呒薌孟俿魐櫘竱靍瓩簩谢鶣毣趭袥竽窢貃烷蒧蛡刜肨庰亓胦舦嵅帖隡絾浕趮锩蚠堩紽萪乣洔瘕壩怦喣睍閴锕譩鴔炚薵怙嗡薘慸鄊諌苐鐪茺灧歒諛屜笻嘄毻冄乜銪嚷審鈥鲲娎厩桗巶聋炤悖都鵃餫替壈芤桝呏夎驒辉鉳盢妧砷騀貔鳛熤拠躰夾炎儮玾柿箤錴舘愽褔鏐殍吟炂欣材埚钳秅