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STIMI在铅内流及其细胞毒性的分子机制研究的开题报告

标题：STIMI在铅内流及其细胞毒性的分子机制研究

研究背景和意义：

铅是一种全球性的污染物，它产生了广泛的环境和健康影响。低水平的铅中毒可以引起生长迟缓和认知障碍等神经系统疾病。很多研究表明，铅对人体的细胞和器官的毒性作用与其对钙离子信号通路的影响有关。特别地，铅可以影响细胞内钙离子水平和钙离子通道的表达，从而导致多种细胞的死亡和疾病状态。STIMI（stromalinteractionmolecule）是一种调控细胞内钙离子通道活性的蛋白质，最近的研究表明它可能与铅在组织内的毒性作用有关。

因此，本研究将通过分子生物学实验和细胞生物学方法，探索STIMI在铅内流及其对细胞毒性的分子机制。这将有助于进一步了解铅对钙离子信号通路的影响机制，同时为研究和预防铅中毒提供新的理论依据。

研究内容和方法：

1.建立STIMI倒转模型

将STIMI倒转表达于293T细胞中，使用荧光染料检测荧光信号，在荧光激光共聚焦显微镜下观察其与原生态细胞的内质网发生差异。

2.铅离子引起STIMI的激活

不同浓度的铅离子处理细胞系，通过WesternBlot分析STIMI的表达变化，以及STIMI活性的变化。

3.铅离子对ER膜张力的影响

利用小分子探针（FLIPER）测定细胞内ER膜张力，分析铅离子对其的影响。

4.STIMI对铅离子毒性的作用

建立STIMI缺陷的HEK293T和SH-SY5Y细胞株，在不同浓度的铅离子作用下，计算细胞增殖能力，同时使用流式细胞术检测凋亡细胞的比例。

研究预期结果和意义：

本研究研究的预期结果和意义如下：

1.确定STIMI在铅内流中的作用机制和细胞毒性。

2.建立模型和技术平台，为探索新的抗铅中毒药物提供基础。

3.研究结果为制定除铅策略提供新的理论依据。

4.为铅离子细胞毒性的治理和环境保护提供科学策略。