畜禽养殖场环境微生物致病性和耐药性调查研究.PDF

— — 46—— 中国动物检疫 2011年第28卷第 11期 畜禽养殖场环境微生物致病性和耐药性调查研究 王 娟 ，刘书科 ，黄秀梅 ，王玉东 ’，李 葳 ’，郑增忍t (1．中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032；2．平度市崔召动物防疫监督站，山东青岛 266035) 摘 要：为了解掌握养殖场中环境微生物对养殖业和公共卫生造成的影响，初步对我国养殖场环境微生物进行了研究。对吉 林、湖北等省份的部分养猪场和养鸡场环境采样，并进行大肠杆菌和沙门氏菌分离鉴定，同时对从鸡舍和猪舍内分离大肠杆菌和 沙门氏茵进行动物致病性实验及对 13种抗生素的耐药性实验。实验结果表明，所有实验的沙门氏菌和90．7％的大肠杆菌菌株对 小白鼠有致病性；所有分离菌株对磺胺类药物的耐药性非常严重，其次是对四环素，对其他药物也有不同程度的耐药性 关键词：养殖场；环境；大肠杆菌；沙门氏菌；致病性；耐药性 中图分类号：$852．61 文献标识码：B 文章编号：1005-944X(2011)11-0046-02 1 设备和试剂 进行大肠杆菌和沙门氏菌分离鉴定。 1．1 设备 3．2 分离鉴定结果 共分离鉴定大肠杆菌 120株， 生物安全柜，恒温培养箱，冰箱，可见分光光度计。 沙门氏菌89株。 1．2 试剂 4 细菌致病性实验 麦康凯培养基，沙门氏菌显色琼脂，MH 肉汤，鉴 对从鸡舍和猪舍分离的82株分离菌进行小白鼠 定用血清等。 (12～16g)致病性实验，其中大肠杆菌44株和沙门氏 2 样品来源 菌38株。结果表明，大多数分离菌对小白鼠有致病 在鸡舍和猪舍 内采集空气和粪便样品；在鸡舍 性。具体结果如下。 和猪舍周围采集土壤样品。共采集样品 168份。 4．1 大肠杆菌致病性 3 细菌分离鉴定 对实验的44株大肠杆菌进行小白鼠致病性实 3．1 方法 按照GB47893—20010和GB4789A．20010 验，其中致小白鼠24小时内死亡的有 15株，占实验 猪业经济损失最重要的疾病之一问。常呈隐性发病， 方法[s]．北京：中国标准出版社，2002． 多取慢性经过，一旦感染，便难以消除。 [3]刘茂军，张映，邵国青，等．猪支原体肺炎可疑肺组织PCR 血清学诊断虽然可以检测出Mhp抗体的存在， 检测方法的建立 J『1．山西业大学学报：自然科学版，2009，29 (5)：444-447． 作为诊断是否感染肺炎支原体的依据，但并没有直接 4【]薛云，赵战勤，陈杨，等．多重PCR方法快速检测猪的5种 检测其病原，由于个体血清转阳时间差异较大，因此 呼吸道病原菌[J]．畜牧兽医学报，2009，40(8)：1222．1228． 仅仅依靠血清学诊断来确诊其感染支原体还不够。 [5]嵇辛勤，段志强，华再东，等．香猪场肺炎支原体的血清学调 利用PCR方法进行猪肺炎支原体的检测，为确定 查与分析[J】．黑龙江畜牧兽医，2009(9)：92-93． 猪感染率提供了更加精确的方法’7】【。本试验用于PCR [6】李彦明，张映．猪肺炎支原体及其生物学研究进展[J]．动物 检测病变肺脏的Mhpldh(乳酸脱氢酶)引物，具有种 医学进展，2003，24(3)：25．27． 特异性，能与其它种类的支原体 (如猪鼻支原体)相区 [7】MarinaSibila，MariaPieters，Thom