mo真核生物的转录与转录调控.pptx

● 真核生物RNA聚合酶;RNA聚合酶亚基;真核生物RNA聚合酶的活性;RNA聚合酶II的CTD;RNA聚合酶I基因：核糖体重复;每一rRNA基因产生一个45S的rRNA转录物，随后被切成28S 、18St)和5.8SrRNA各一个。这种RNA多基因拷贝的连续转录是产生足够量且加工的rRNA、进而包装进核糖体所必需。;RNA聚合酶I启动子 前rRNA启动子由两个转录控制区域组成。核心元件和上游调控元件(UCE;;;选择因子（SL1）与UBF-DNA复合物结合并使其稳定，然后RNA聚合酶I结合，起始转录 SL1四亚基组成，包括TATA结合蛋白（TBP，为所有RNA聚合酶转录起始所需）和RNA聚合酶I特异的TBP相关因子（TAF）;;RNA聚合酶III基因：5S与tRNA基因的转录;TFIIIC与启动子结合；TFIIIB与TFIIIC-DNA复合体结合；IFIIIB含三个亚基：TBP，BRF和B’’,负责募集RNA PolIII，起始转录;5S rRNA基因 基因串联成簇， 启动子含有2个保守框：C框位于起始位点下游81-99个碱基处；A框位于起始位点下游50-65个bp TFIIIA结合在启动子C框后，TIIIC与TFIIIA-DNA复合体结合，并与A框结合， TFIIIB结合进来募集聚合酶，起始转录。;可变的RNA聚合酶III启动子，可被上下游序列调控RNA聚合酶III的终止 在无辅助因子参与下终止，一串A足以终止转录;RNA聚合酶II基因：启动子与增强子;真核生物启动子的结构;1、核心启动子 许多RNA聚合酶II启动子都含有一个称做TATA框的序列，该序列位于起始位点上游25－30bp处。其他的基因含有一个与起始位点重叠的起始元件，这些元件为基本转录复合体形成和转录起始所需。;2、上游启动子元件 启动子上游100－200bp内的元件通常是有效转录所需的，例如SPl和CCAAT框。;（2）增强子：指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。;增强子特点：;An enhancer can activate a promoter from upstream or downstream locations, and its sequence can be inverted relative to the promoter;③大多为重复序列，一般长约50bp，适合与某些蛋白因子结合。其内部常含有一个核心序列：（G）TGGA/TA/TA/T（G），该序列是产生增强效应时所必需的；;⑤ 没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应；;增强子作用机理： ;（3）沉默子：某些基因含有负性调节元件——沉默子，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。;启动子对转录的影响;通用转录因子与RNA聚合酶II的起始;TFIID 与TATA框结合，由TATA结合蛋白（TBP）与TBP相关因子或多辅助因子构成 TBP 有一个可与TATA的DNA小沟结合的马鞍型结构，可使DNA解旋???引入45o的弯曲，所有RNA聚合酶转录起始所需 TFIIA 可增强TFIID与TATA框的结合，似乎可以终止抑制因子与TFIID的结合 TFIIB 与IFIID结合，为RNA聚合酶和TFIIF加入复合体起桥梁作用 RNA聚合酶进入之后的结合因子 TFIIE，TFIIH和TFIIJ，其中TFIIH可使RNA聚合酶II的羧基末端结构域磷酸化，导致复合体形成。;;转录后加工;真核基因结构;反式作用因子;转录因子的类型;2、结构;（1）DNA结合结构域：; 同源域是一个DNA结合域，它由60个氨基酸组成，并形成3个α螺旋。C端的α螺旋有17个氨基酸，它结合DNA大沟。同源域N端臂插入DNA小沟。 含同源域的蛋白质可能是转录的激活剂或阻抑物。;Helix 3 of the homeodomain binds in the major groove of DNA, with helices 1 and 2 lying outside the double helix. The N-terminal arm lies in the minor groove, and makes additional contacts. ;2、锌指结构;;1）经典的“锌指”蛋白质;谨慎理解锌指存在的意义： 尤其是蛋白质仅含有单个锌指时，锌指可能参与RNA的结合而不是DNA结合，或它与任何核酸结合活性均无关。;2）类固醇受体;配体的结合使得受体（如类固醇受体）能够结合应答元件： 配体结合于受体的C端结构域，提高了DNA结合域对DNA特异靶位点的亲和力。;3、碱性-亮氨酸拉链;这类蛋白质的DNA结合结构域实际是以碱性区和亮氨酸拉链结构域整体