仪器分析实验：高效液相色谱法.doc
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高效液相色谱法
一 实验目的：
了解高香液相色谱的仪的基本构造和工作原理，熟悉液相操作方法。
学习咖啡因的高效液相色谱保留值定性和用标准法定量。
二 实验原理：
咖啡因存在于茶叶中，咖啡和可可中，可溶于水，又兴奋中枢神经的作用。可利用反相高效液相色谱法以标准曲线法测定茶叶，咖啡和可可饮料中的咖啡因含量。
三 实验仪器和试剂：
Acme2000高效液相色谱仪（Yinglin，），微量进样针，溶剂过滤器，抽滤装置，移液管，容量瓶。
甲醇，蒸馏水，茶叶。
四 实验步骤：
1配标准溶液：分别配置5，10，30，50ng/L的咖啡因标准溶液于10ml的容量瓶内。
2样品处理：称取2.000g的茶叶，研碎放入150ml的烧杯中，加入煮沸的蒸馏水100ml，将烧杯放入沸水浴中浸渍40min后，趁热抽滤。冷却后移入250ml的容量瓶内，用蒸馏水定容。准确吸取5ml定容于10ml的容量瓶内。
3液相条件的设置：流动相：甲醇-水（80:20），流速：0.8ml/min，柱温箱：35摄氏度，紫外检测器波长：272nm。
4做咖啡因和浓度的标准曲线
5测量
五 数据处理：
测量茶叶中咖啡因的含量。填写实验报告。
六 思考题：
本实验采取保留时间是对咖啡因实现定量分析，还有其他方法吗？
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