生物化学实验报告-郑州大学.doc
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生物化学实验报告
供检验护理专业使用
班级
姓名
郑 州 大 学 护 理 学 院
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
[目的]
[原理]
[仪器组成]
[操作与结果]
[结果粘贴]
实验二 酶的特异性
[目的]
[原理]
[操作与结果]
加入物 1号试管 2号试管 3号试管 pH6.8缓冲液 20 20 20 1%淀粉 10 10 - 1%蔗糖 - - 10 稀释唾液 10 - 10 煮沸唾液 - 10 - 结果(颜色) 将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。然后向各管中加班氏试剂20滴,沸水中煮沸10分钟,取出勿振摇试管,观察结果并记录。
[分析]三管结果及原因。
实验三 温度、pH、激活剂、抑制剂
对酶反应的影响
[目的]
[原理]
[操作与结果]
(一)温度对酶反应的影响
加入物 1 2 3 1%淀粉 10滴 10滴 10滴 pH6.8缓冲溶液 20滴 20滴 20滴 稀释唾液 10滴 10滴 10滴 温度 0℃ 37℃ 100℃ 在上述温度下放置10分钟后,每管各加入稀碘液1滴 结果 [分析各管的颜色变化原因]
(二)pH对酶反应的影响
加入物 1 2 3 pH5.0缓冲溶液 20滴 - - pH6.8缓冲溶液 - 20滴 - pH8.0缓冲溶液 - - 20滴 1%淀粉 10滴 10滴 10滴 稀释唾液 10滴 10滴 10滴 上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟 稀碘液 1滴 1滴 1滴 结果(颜色) [分析各管的颜色变化原因]
(三)激活剂、抑制剂对酶反应的影响
加入物 1 2 3 4 pH6.8缓冲溶液 20滴 20滴 20滴 20滴 1%淀粉 10滴 20滴 20滴 20滴 蒸馏水 10滴 - - - 1%NaCl - 10滴 - - 1%CuSO4 - - 10滴 - 1%Na2SO4 - - - 10滴 稀释唾液 10滴 10滴 10滴 10滴 上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟 稀碘液 1滴 1滴 1滴 1滴 结果(颜色) [分析各管的颜色变化原因]
实验四 721型分光光度计的使用
[目的]
[原理]
[构造]
[使用]
实验五 血清葡萄糖的测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 10μl - - 葡萄糖标准液5.55mmol/L - 10μl - 血清 - - 10μl 酶酚试剂 1.5ml 1.5ml 1.5ml 将上述各管混匀,置于37℃水浴箱中保温15分钟,取出分别倒入0.5cm的比色杯中,选择波长λ=505nm,用空白管调节“0”及“100”,分别读取标准管及测定管的吸光度
A标、A测。
[计算]
[临床意义]
实验六 琥珀酸脱氢酶的作用及抑制
[目的]
[原理]
[操作]取三支试管按下表操作
加入物 1 2 3 4 匀浆液 10滴 10滴 - 10滴 1.5%琥珀酸钠 10滴 10滴 10滴 10滴 1%丙二酸钠 - 10滴 10滴 10滴 蒸馏水 20滴 10滴 20滴 - 0.02%甲稀兰 1滴 1滴 1滴 1滴 各管混匀,加入少量液体石蜡覆盖表面,置37℃水浴保温15-20分钟,取出勿振摇,观察。 结果(颜色) [思考]
1、液体石蜡起什么作用?
2、各管颜色变化的原因?
实验七 肝脏中酮体的生成作用
[目的]
[原理]
[操作]
加入物 1 2 3 4 肝匀浆 20 - - - 肌匀浆 - 20 - 20 蒸馏水 - - 20 30 pH7.6 磷酸盐缓冲液 15 15 15 15 洛克液 15 15 15 15 丁酸 30 30 30 37℃保温30分钟后取出各加15%三氯醋酸10滴,静止数分钟,各取出清液数滴于显色板上,加入显色粉显色。 结果(颜色) [分析各管颜色变化的原因]
实验八 血浆CO2CP测定
[目的]
[原理]
[操作]
[计算]
[意义]
实验九 血清谷丙转氨酶测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物 空白管 测定管 蒸馏水 0.1ml - 血清 - 0.1ml 基质液 0.5ml 0.5ml 将空白管、测定管分别混匀,置入37℃水浴箱保温30分钟,取出加入2.4二硝基笨肼的盐酸溶液各0.5ml混匀后再置入37℃水浴保温20分钟。取出加入0.4M的NaOH5ml,混匀。
选择波长λ=505nm,用空白管调节“0”及“100”,读取测定管的吸光度A测。查标准曲线。
[结果]
[意义]
实验十 血清钾、钠测定
[目的]
[原理]
[操作]
1、钠测定
计算
2、钾测定
计算
[思考题]血清K+、Na
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