GB/T 36433-2018纺织品　山羊绒和绵羊毛的混合物DNA定量分析　荧光PCR法.pdf

ICS 59.080.01 W 04 £3© 中华人民共和国国家标准 GB/T 36433—2018 纺织品山羊绒和绵羊毛的 混合物DNA定量分析 荧光PCR法 Textiles ——DNA quantitative analysis of cashmere and wool mixture — Fluorescence PCR method 2018-06-07 发 2019-01-01 实施 发 GB/T 36433—2018 百 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中国纺织工业联合会提出。 本标准由全国纺织品标准化技术委员会(SAC/TC 209)归口。 本标准起草单位：上海出入境检验检疫局、中纺标检验认证股份有限公司。 本标准主要起草人：费静、谢璐蔓、隋阳华、斯颖、唐敏峰、陆维民。 I GB/T 36433—2018 纺织品山羊绒和绵羊毛的 混合物DNA定量分析 荧光PCR法 1范围 本标准规定了采用荧光PCR法测定纺织品中山羊绒、绵羊毛的DNA定量检测方法。 本标准适用于纺织品混合物中两组分山羊绒、绵羊毛含量的检测。 本标准不适用于回用、剥色的山羊绒和绵羊毛纤维，以及安哥拉山羊毛。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 16988特种动物纤维与绵羊毛混合物含量的测定 GB/T 19495.1转基因产品检测 通用要求和定义 GB/T 19495.2转基因产品检测实验室技术要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 聚合酶链式反应 polymerase chain reaction ； PCR 在DNA聚合酶催化下 ，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点 ，以4种单核昔酸(dNTP)为 底物，通过变性、退火、延伸的循环反应，使极少量的DNA的特定片段，在数小吋内扩增出百万倍的 DNA的体外扩增链式反应。 3.2 实时荧光定量 PCR real-time fluorescence PCR 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实吋监测整个PCR进程，再通过曲线对未知 模板进行定量或定性分析的DNA扩增方法。 3.3 引物 primer 在核酸合成反应时 ，作为每个多核昔酸链进行延伸的出发点并起作用的一小段单链DNA 或 RNA。 3.4 TaqMan 探针 TaqMan probe 一种荧光基团连接在探针的5 ’末端，而淬灭基团则在3 ’末端的寡核昔酸链。 注 ：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针 ，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭 基团吸收；PCR扩增时 ,Taq酶的5-3外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从 而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与