第二节基因工程及其应用讲课.pptx

（2015四川卷9）将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T－DNA片段能转移到植物细胞中）。 （1）过程①需用同种＿＿＿＿＿＿＿＿＿酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用＿＿＿培养基。 ;（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让＿＿＿＿进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 （3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加 ＿＿＿＿＿＿＿以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 （4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是＿＿＿＿＿＿。种植转基因抗虫棉能减少＿＿＿的使用，以减轻环境污染。 ;（2015重庆6）下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（ ） A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用;（2014广东25）利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图14所示，下列叙述正确的是 （ ）;;（2014重庆4）题4图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（ ） A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异;（2014江苏23）下列关于基因工程技术的叙述，错误的是 （ ） A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达;（2014天津） 8．（12分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验： Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶 （1）PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。 （2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。 （3）大肠杆菌不能降解纤维素， 但转入上述建构好的表达载体后 则获得了降解纤维素的能力，这 是因为 。;Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响;Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性 在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。 A．仅针对bglB基因进行诱变 B．bglB基因产生了定向突变 C．bglB基因可快速累积突变 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变;（九）回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（9分） pIJ702是一种常用质粒（图20），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。 67．质粒DNA分子中的两条链靠____键维系成双链结构。;（九）回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（9分） pIJ702是一种常用质粒（图20），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。 68．以SacⅠ和SphⅠ切取 的目的基因置换pIJ702上 0.4kb（1kb=1000对碱基） 的SacⅠ/SphⅠ片段， 构 成重组质粒pZHZ8。 上述 两种质粒的限制酶酶切片 段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点，并 说明判断依据______________________________________