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学案　微生物的利用 [考纲要求]　 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。 考点一　微生物的分离与培养[重要程度：★★☆☆☆] 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对_______________的不同需求，配制出供其______________的营养基质。 (2)营养构成：一般都含有_______________和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对________、氧气以及_______________的要求。 (3)种类：按照物理性质可分为________培养基和固体培养基。 2．无菌技术 (1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止______________的方法。 (2)关键：防止_______________的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法[连线] 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 →__________→→__________→_____________ (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤：___________。 ③常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面_______________，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的_______________，然后将_______________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用_______________的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用_______________的方法。 1．消毒和灭菌的不同点 比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 _______________ 部分生活状态的微生物 _______________ 灭菌 _______________ 全部微生物 _______________ 2.两种纯化细菌方法优缺点的比较 项目 优点 缺点 平板划线法 不能计数 稀释涂布平板法 吸收量较小，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 3. 稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低，为什么？ 答案　这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 4．平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同： (1)第一次操作：__________________________________。 (2)每次划线之前：杀死_______________________残留的菌种，使_______________的菌种直接来源于上次划线的末端。 (3)划线结束后：杀死___________________________，避免细菌污染环境和感染操作者。 易错警示　配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项 (1)倒平板的适宜温度是50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 (2)平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 1．下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是(　　) A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理 C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源 2．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即__________________和______________________。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力__________________。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、__________和____________________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 考点二　微生物的筛选和计数[重要程度：★★☆☆☆] 一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成___________，这种物