第八章有害物质的测定.ppt

; 一、概述;农产品中有害物质的来源 ;二、 常用的检测方法 ;第一节 农产品中农药残留及其检测;农药残留是指由于喷施农药后存留在环境和农产品、食品、饲料、药材中的农药及其降解代谢产物, 还包括环境背景中存有的污染物或持久性农药的残留物再次在商品中形成的残留。 农药残留量是指农药本体物及其代谢物的残留量的总和, 表示单位为 mg/kg。当农药过量或长期施用, 导致食物中农药残存数量超过最大残留限量（MRL）时, 将对人和动物产生不良影响, 或通过食物链对生态系统中其他生物造成毒害。;;第一节 农产品中农药残留及其检测;;;;;一、有机氯农药残留及其检测;具有较高的杀虫活性, 杀虫谱广, 对温血动物的毒性较低, 持续性较长, 加之生产方法简单, 价格低廉。因此, 这类杀虫剂在世界上相继投入大规模的生产和使用, 其中, “六六六”、DDT 等曾经成为红极一时的杀虫剂品种。 20 世纪 70 年代开始, 许多工业化国家相继限用或禁用某些 OCPs, 其中主要是 DDT、六六六、狄氏剂。 原因：性质稳定, 在自然界不易分解, 属高残留品种, 因此在世界许多地方的空气、水域和土壤中仍能够检测出微量 OCPs 的存在, 并会在相当长时间内继续影响食品的安全性, 危害人类健康。 ;GC-ECD 法测定有机氯农药残留 ;二、有机磷农药残留及其检测;有机磷杀虫剂药效高, 易于被水、酶及微生物所降解, 很少残留毒性等, 20世纪 40s-70s 年代得到广泛应用。 有机磷杀虫剂存在抗性问题, 某些品种存在急性毒性过高和迟发性神经毒性问题。从70 年代以后有机磷杀虫剂的研究和开发速度大大放慢了, 但在杀虫剂领域, 目前它仍被广泛使用。 过量或施用时期不当是造成有机磷农药污染食品的主要原因。 有机磷农药主要是抑制生物体内的胆碱脂酶的活性, 导致乙酰胆碱这种传导介质代谢紊乱, 产生迟发性神经毒性, 引起运动失调、昏迷、呼吸中枢麻痹甚至死亡。 ;有机磷农残分析方法包括色谱法、波谱法和酶抑制法三大类, 而以色谱法中的 GC 及 HPLC 法应用的最多。AOAC 在 20 世纪 80 年代就对大部分有机磷农药建立了气相色谱分析方法。近年来, AOAC 又有近半数的有机磷农药建立了 HPLC 检测法。 我国食品卫生国家标准 GB/T 5009.20-2003采用的是气相色谱法检测有机磷农药残留。;GC法 ;三、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测;第一法 速测卡法（纸片法）;试剂 3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡） 3.2 pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾，用500mL蒸馏水溶解。 仪器 4.1 常量天平 4.2 有条件时配备37℃±2℃恒温装置。 ;整体测定法 选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上。 取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。;表面测定法（粗筛法） 擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。 取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。 放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。 将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反应。 每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。;结果判定 阳性：酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制；阴性：未抑制。 与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。 白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。 对阳性结果的样品，可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。;第二法 酶抑制率法（分光光度法）*;试剂 pH8.0缓冲溶液：分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min的吸光度变化 ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超过四天。 可选用由以上试剂制备