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GB/T 36848-2018鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法.pdf

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ICS 65.020 .0 1 B 16 国; 中华人民共和国国家标准 GB/T 36848-2018 鲤梨日斑类病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of A voeado sunblotch viroid 2018-09-17 发布 2019-04-01 实施 国家市场监督管理总局峪非 中国国家标准化管理委员会 0(.. I (J GB/ T 36848-20 18 目u 昌 本标准按照GB/T 1. 1-2009 给出的规则起草。 本标准由全同植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)提出井归口。 本标准起草单位:中|司检验检疫科学研究院、中华人民共和l 同深圳|归入境检驹检疫局、中华人民共 和国山东州入境检验检疫局。 本标准主要起草人: 张永江、郑耘、张京宜、辛言言、向均、卢小雨。 I GB/ T 36848-20 18 鳝梨日斑类病毒检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了鳝梨日斑类病毒逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和往复双向聚丙烯毗股凝胶电泳 的检疫鉴定方法。 本标准适用于可能携带鳝梨日斑类病毒的植物及其果实的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日 期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 基本信息 中文名: 蹲梨日斑类病毒 学名: AvocadοJ《 1111/Jlotch v iroid 缩写: ASBVd 分类地位: 螃梨日斑类病毒科(八vsunviroiclae ) 跨梨日斑类病毒属(八vsunviroid ) 。 鳝梨日斑类病毒的其他信息参见附录A 4 方法原理 根据ASBVd 在寄主植物上的症状进行初步判定; 根据其RNA 向然状态和变性后的不同结构分子 在聚丙烯耻胶凝胶电泳中迁移率的差异进行往复双向聚丙烯酌股凝胶电泳(R eturn-Polyacrylamide Gel El cctrophorcsi日 , R)检测; 根据基因组特征进行RT-PCR 检测, 通过电泳条带大小进行结果 判定。 5 仪器设备及设施、 用具及试剂 5. 1 仪器设备及设施 天平(感量 0. 001 g)、高速冷冻离心机、pH 计、PCR 仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、隔离检疫泪 室、恒泪水泊、低泪冰箱等。 微量移液器(2 µL、 10 µL、 20 µL、 100 µL、 200 ,uL、 1 000 µL)、研钵、离心管(1. 5 mL、2 . 0 mL)、花盆、 消毒土等。 5.2 RT-PCR 检测试剂 除另有规定外,所有试齐lj 均为分析纯,实验用水应符合GB/T 6682 中相关规定。 具体见附录B。 GB/T 36848-2018 5.3 往复双向聚丙烯酷脏;疑胶电泳检测试剂 |除另有规定外,所有试剂均为分析纯,实骑用水应符合GB/T 6682 中相关规定。 具体见附录 Co 6 样品制备 6. 1 种子类 随机抽取100 粒利t 子,
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