GB/T 36770-2018澳洲葡萄类病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 B 16 OB 中华人民共和国国家标准 GB/T 36770—2018 澳洲葡萄类病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Australian grapevine viroid 2018-09-17 发布 2019-04-01 实施 发布 GB/T 36770—2018 ■ r ■ —— 刖 弓 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、福建省农科 院、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:邓丛良 、张永江、王英超、向均、赵晓丽、谢丽雪。 T GB/T 36770—2018 澳洲葡萄类病毒检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了澳洲葡萄类病毒的检疫鉴定方法。 本标准适用于可能带有澳洲葡萄类病毒的葡萄繁殖材料的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3澳洲葡萄类病毒基本信息 学名 z Australian grape-vine uiroid 缩写:AGVd 异名：澳大利亚葡萄类病毒 分类地位：马铃薯纺锤块茎类病毒科(Pospiviroidae) 、苹果锈果类病毒属(Apscaviroid) 澳洲葡萄类病毒的其他信息参见附录A。 4方法原理 类病毒检测主要针对其核酸序列 。主要的方法有反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和核酸分子 杂交。 5仪器设备、主要用具和主要试剂 5.1仪器设备 电子天平(感量0.001 g)、普通天平(感量0.1 g) 、高速冷冻离心机、小型瞬时离心机、普通冰箱、超 低温冰箱(一80 °C) 、制冰机、涡旋振荡器、磁力搅拌器、高压灭菌锅、pH计、PCR仪、微波炉 、电泳仪、电 泳槽、凝胶分析成像系统、实时荧光定量PCR仪、杂交炉、塑料薄膜封口机、紫外交联仪、暗箱、摇床、恒 温水浴锅、组织破碎仪等。 5.2主要用具 可调移液器(2.5 卩L, 10 卩L, 20 fiL, 200 卩L, 1 000 卩L, 5 000 #L) 、无 RNA 酶吸头 (10 卩L, 20 卩L, 200 fj-L, 1 000 卩L, 5 000 #L) 、无 RNA 酶离心管(1.5 mL, 5 mL, 10 mL) 、研钵、研棒、磁性分 离架、PCR反应管(200 卩L)、实时荧光96孔反应板、杂交瓶、杂交膜、杂交袋、X光片。 5.3主要试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T 6682中相关规定 。普通RT-PCR检