GB/T 36841-2018桃丛簇花叶病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 B 16 国 中华人民共和国国家标准 GB/T 36841-2018 桃丛簇花叶病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Peαch rosette mosαic virus 2018-09-17 发布 2019-04-01 实施 国家市场监督管理总局峪非 中国国家标准化管理委员会 0(.. I (J GB/ T 3684 1-20 18 目lj 昌 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC 271）提出并归口。 本标准起草单位： 中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国南海出入境检验检疫局、中华人民共 和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国烟台出入境检验检疫局、浙江大学。 本标准主要起草人： 张永江、邱艳红、谈谓、廖富荣、 向均、李金庆、吴建祥、辛言言。 I GB/ T 36841-2018 附录 D （ 规范性附录） 生物学测定 D.1 接种 将桃、葡萄、李或洋李病叶力11 1 : (10 ~ 20) (1 g 样品： 10 m L ~ 20 mL 缓冲液）的磷酸盐缓冲液 ( 0 .06 mol/L pH 8. 0）于研钵中充分研磨，在待接种植物。叶期）ll十片表而均匀撒上硅藻土，用手指蘸取 研磨好的汁液轻轻涂抹于叶片表丽。 将待接种的植物预先在黑暗处放置 24 h 再接种效果更好。 每个 待测样品接种3 棵奇主植物。 接种后的寄主植物放置于隔离空间内进行症状观察，观察时间为 20 cl 左右。 D.2 鉴别寄主症状 克色黎（（‘h川1ο户udinm amaranlicυfur ） ： 接科I 4 cl ~ 7 cl 后，接种叶有模糊褪绿色斑。 系统症状包括 斑驳，叶畸形，扭曲或枝l]Ji 坏死，于 7 cl~ 10 d 内病株出现上述系统症状，最后病株矮化。 昆诺阿黎（C. qui川α ） ： 接种 4 cl ~ 7 cl 后， 接种叶有模糊局部褪绿斑，后叶弯曲，脱落。系统症状包 括黄色斑纹和叶片反卷，茎干严重扭曲，顶端坏死。 普通烟（Nicoti们1α talw川,n ）：接种叶褪绿草f或坏死环斑（仅发生于强毒株系），后产生轻型性系统 褪绿环斑。 9 GB/T 36841-2018 附录 E （规范性附录） 斑点酶联免疫眼附测定（ Dot-ELISA) E.1 试剂材料 E. 1.1 硝酸纤维素膜 孔径为 0.45 µm 的硝酸纤维素膜。 E.1.2 第一抗体 特异性