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人胚胎干细胞建系，鉴定及分化为多能性间充质样前体细胞的开题报告

一、研究背景

人类胚胎干细胞（hESCs）是一种独特的细胞类型，具有极高的分化潜能和自我更新能力。这些细胞可以分化成各种不同类型的细胞，包括神经元、心肌细胞和肝细胞等。因此，它们已成为研究生物医学和再生医学的重要模型。

然而，hESCs的研究和应用，例如临床治疗，受到了许多限制。一个主要的限制是伦理问题，即使用胚胎来获得hESCs是不道德的。因此，寻找其他来源的干细胞变得至关重要。在这方面，iPSCs（诱导多能性干细胞）和多能性间充质样前体细胞（MSCs）是最有前途的候选源。

二、研究目的

本研究的目的是建立一种可靠的方法，从iPSCs和MSCs中获取多能性间充质样前体细胞，以便用于进一步研究和应用。

三、研究方法

1.iPSCs的建立和鉴定

采用经典的四种因子诱导法将人成体细胞重编程成iPSCs。用ALP、TRA-1-60、TRA-1-81和SSEA-4这四个表面标志物检测建系质量，并用RT-PCR检测确定多能性基因的表达。

2.MSCs的提取和分化

提取新生儿肝脏、胎盘和脐带等多个组织中的MSCs。进行表面标志物鉴定，包括CD90，CD73，CD105，CD34，CD45和HLA-DR，以确认MSCs的纯度。使用培养基和不同的生长因子进行多能性分化。

3.MSCs和iPSCs的共培养

将MSCs和iPSCs共同培养在同一固定器中，并优化细胞积聚和分化的条件。

4.鉴定和分化

评估多能性间充质样前体细胞的分化潜能和特性，包括其基因表达、表面标志物和形态学特征。

四、研究意义

该研究的成功将有助于寻找一种替代方案，减少人胚胎的使用，并能够应用于多种细胞疾病的治疗。此外，该研究还将为未来的研究提供重要的平台，以进一步探索多能性间充质样前体细胞的物理和生理特性。