【2017年整理】xu《细胞生物学实验》教案.doc

实验一 细胞形态结构的观察与显微测量（必做） 一、实验目的： 1．熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构 2．掌握临时装片的制作方法 3．掌握显微测量的原理和方法 4．掌握生物绘图的方法。 二、实验原理： 细胞是生物体结构功能的基本单位，其形态与功能相适应。不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构，以适应其功能。通过制作临时装片，可以观察很多细胞的结构，并借助测微尺测量细胞直径，进而获得细胞的体积。 三、实验仪器、试剂及材料： 仪器：光学显微镜（每人1台），载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、牙签、滴管 测微尺（镜台测微尺；目镜测微尺） 试剂：1%碘液、瑞氏染液（如果观察血细胞，则需瑞氏染液） 材料：洋葱、红辣椒、紫色落葵（或紫罗兰）、血细胞悬液、口腔上皮细胞 四、实验步骤： 1．洋葱鳞茎表皮细胞的观察 在载玻片中央滴一滴1%碘液 用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框 用镊子撕下表皮 在碘液中铺平 盖上盖玻片 用吸水纸吸去多余碘液（也可帮助排除气泡） 显微镜下观察（同法制红辣椒表皮细胞装片） 2．人口腔黏膜上皮细胞的观察 在载玻片中央滴一滴1%碘液 用牙签刮取上皮细胞 在1%碘液中搅动分散细胞 染色1分钟 盖上盖玻片观察 3．血细胞观察（见《细胞生物学实验教程》第9页） 在载玻片右端滴一滴血 用另一张载玻片以30~45度角（两玻片夹角） 推移血液成均匀薄膜 滴一滴瑞氏染液染色1～3分钟 自来水冲洗染液，吸水纸吸干 镜检 4．显微测量 （1）原理： 测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，目镜测微尺位于目镜内，为玻璃圆片，上有一条带刻度的直线，精确度较镜台测微尺的低；镜台测微尺是一块载玻片，中央圆形区域内有一带刻度的直线，精确度较目镜测微尺高。 （2）测量： 用目镜测微尺的格数度量细胞的大小， 目镜测微尺每格代表的实际长度用镜台测微尺来校定。 A、将镜台测微尺放入载物台上，转动目镜，使二者平行。选择一处让二者重合，然后向右侧寻找再次重合处，记下二者的数值，并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。 目镜测微尺每格的长度= ? 正确答案: 2.5 μm B、将镜台测微尺取下，换上洋葱表皮细胞、口腔黏膜上皮细胞、血细胞涂片，用目镜测微尺测量出其长度和宽度。 C、应用V= 4/3 Πab2 (a为长半径，b为短半径)计算出观察细胞的体积。 为什么要测量5-10个细胞的数据，再计算平均值？ 五、思考题：1．结合实验分析细胞形态结构的特点及其与功能的适应性。 2．测量细胞时应注意哪些问题？ 3．绘图：洋葱表皮细胞、口腔黏膜上皮细胞、各种血细胞 附：生物绘图必须注意的问题 绘图是生物实验报告的一种重要形式，基本要求如下： 1．准备好HB铅笔、橡皮、刀、尺子及绘图纸，将绘图纸放在右边。 2．绘图时，特别注意观察物的形状、各部分的位置、比例和毗邻关系。 3．每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得，通常图占报告纸左上方2/3 的面积，并考虑注字的位置。 4．观察清楚后，选择典型的细胞或组织，左眼看显微镜，右眼配合右手，先用铅笔在纸上轻轻描出轮廓，使形状正确，然后再用清晰的线条绘出，线条粗细要均匀不要重复。注意纸面的整洁，铅笔要保持尖锐，尽量少用橡皮。 5．用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗和立体感一律以点的疏密来表示（深色用密集的黑点，浅色用稀疏的黑点），点要圆而一致，不得涂暗影或进行其它美术加工。 6．图绘好后，要在图的右侧注明各部分结构名称，引线用直尺画出，间隔要均匀，长短适度，各引线不能交叉，图注要尽量排列整齐，注字要用正楷。 7．每一个图下面要注明图的名称、放大倍数。 8．绘图纸上所有注字（包括姓名、实验日期、题目等）均用铅笔书写，不能用其他笔写。 实验二 观察黑藻的叶绿体和细胞质流动（选做） 一、实验目的： 1．初步掌握高倍显微镜的使用方法。 2．观察叶绿体形态和分布。 3．通过显微镜的实际观察，理解细胞质流动是一种生命现象。 二、实验原理： 1．高等植物的叶绿体存在于细胞质中，叶绿体呈 绿 色、 扁平的椭球形或球形 ，高倍显微镜下清晰可见。 2．活细胞中的细胞质处于不断流动的状态，用 叶绿体 的运动作为标记可观察细胞质的流动。 三、实验程序： 光照、室温条件下水中培养黑藻——取一片幼嫩的小叶——做临时装片：清水+小叶+盖玻片——低倍观察叶片细胞——高倍观察叶绿体的流动及流动方向。 四、注意事项： 1、细胞