肿瘤细胞免疫治疗演示文稿.ppt

CIK细胞制备的流程 CIK细胞制备的关键细胞因子 细胞因子中IL-2 效应最强，它能促进所有T细胞亚型增殖，虽然CIK细 胞的杀瘤活性在体外并不依赖IL-2，但IL-2在体外可促 进CIK细胞的增殖和杀瘤活性。 将IL-2基因用电穿孔法转染CIK后，患者血清中的GM-CSF、IFN-γ、TGF-β水平均有所升高，外周血中CD3+的淋巴细胞也增加。 进一步研 究发现IFN-γ加入CIK培养基中的时机至关重要，在加 IL-2前24h向培养体系中加入IFN-γ比两者同时或在IL-2 之后加入IFN-γ更能提高细胞毒性。 CIK的应用范围 转移性肾细胞癌（与化疗联合患者） 卵巢癌 胰腺癌 肝细胞癌（相对疗效较低） 白血病（CIK细胞联合造血干细胞移植） 淋巴瘤 多发性骨髓瘤 肺癌等肿瘤 存在的问题与展望 获取CIK治疗的最佳疗效和最佳疗效的维持 是目前CIK治疗的核心问题 CIK细胞的数量和毒力是CIK治疗疗效的关键 对CIK 细胞的抗瘤机制还不是完全清楚 CIK细胞的不良反应和治疗效果尚缺乏大规模随 访及临床调查结果 如何将CIK 治疗和其他治疗手段结合获得更好的疗效 如何获得足够数量具有更高细胞毒活性的效应细胞 肿瘤的TIL细胞治疗 肿瘤浸润的淋巴细胞（TIL） 1986年Rosenberg研究组首先报道了肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte,TIL）。TIL细胞表型具有异质性，一般来说，TIL中绝大多数细胞CD3阳性。不同肿瘤来源的TIL细胞中，CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例有差异，大多数情况下以CD8+T细胞为主。NK细胞的标记（CD16，CD56）在TIL体外加IL-2培养过程中有先增高后降低的趋势。 TIL细胞的制备与特点 用机械处理和酶消化方法，从肿瘤局部分离出肿瘤浸润的淋巴细胞，加入高剂量IL-2体外培养，残存的肿瘤细胞7-13天全部死亡。 经IL-2活化的TIL与来自PBMC的LAK细胞相比，其特点是： （1）可扩增50-100倍，在治疗中可以减少效应细胞和IL-2的用量，对LAK治疗无效的肿瘤仍有一定治疗效果； （2）主要由CD8阳性细胞诱导而来，在动物实验中发现TIL杀伤肿瘤作用具有特异性； TIL细胞的制备与特点 （3）宿主的抑制状态有利于TIL的杀伤作用，因此治疗时加用环磷酰胺（Cy）100mg/kg可明显提高疗效，可能与免疫抑制药能消除抑制性细胞或因子，增强过继免疫治疗作用有关，因而可减少IL-2的用量，降低毒副反应； （4）可从手术切下肿瘤组织、肿瘤引流淋巴结、癌性胸腹水中获得淋巴细胞，经加IL-2培养后，其生长、扩增能力强于LAK细胞，副作用明显低于IL-2/LAK疗法。 LAK/CIK和TIL的发展趋势 应用LAK或TIL细胞治疗发展的方向是： （1）提高LAK细胞的纯度 （2）改变国际转移细胞在体内的分布，如改变注射细胞途径和方法 （3）与其它细胞因子如IL-12、IFN、TNF-α和CSF联合治疗，增强LAK的杀伤活性 （4）将编码某些细胞因子（如IL-2、TNF等）cDNA转染LAK或TIL用于细胞免疫治疗 （5）与DC疗法联合应用，提高治疗效率 肿瘤的γδT细胞治疗 γδT细胞 γδT细胞是执行固有免疫功能的T细胞，其TCR由γ和δ链组成。 主要分布于肠道呼吸道以及泌尿生殖道等黏膜和皮下组织，在外周血中只占CD3+T细胞的0.5%-1%。 其TCR缺乏多样性，可直接识别某些完整的多肽抗原。 γδ T细胞所识别的抗原种类有限 ①HSP； ②感染细胞表面CD1分子提呈的脂类抗原； ③某些病毒蛋白或表达于感染细胞表面的病毒蛋白； ④细菌裂解产物中的磷酸化抗原。 γδ T细胞的作用机制 ① γδT细胞能够与多种免疫细胞发生作用，参加抗肿瘤免疫应答。 ② γδT细胞能够在肿瘤发生的早期阶段迅速引起有效的抗肿瘤免疫应答。 ③ γδT细胞在抗肿瘤免疫过程中具有重要的保护作用。 ④ γδT能够利用细胞毒效应杀伤肿瘤细胞，防止肿瘤的发生发展。 ⑤ γδT细胞能够分泌相关因子，这些因子能够放大肿瘤信号。 ⑥ γδT细胞能分泌穿孔素，诱导肿瘤细胞凋亡。 γδ T细胞疗法的特点及应用 γδT细胞是一种既能杀伤癌细胞，肿瘤干细胞，又能识别癌抗原的免疫细胞，它的杀伤性较强，但杀伤肿瘤干细胞的作用不如NK细胞。 杀伤癌细胞后，可协助DC细胞识别肿瘤抗原，并提呈给其他免疫细胞。 γδT细胞主要分布于皮肤和黏膜组织上，因此对于黏膜方面的癌症（如消化道、呼吸道、生殖系统的肿瘤）治疗效果较显著。 肿瘤免疫细胞治疗 肿瘤是机体中正常细胞，在不同始动与促进因素长期作用下所产生的增生与异常分化所形成的新生物。 肿瘤的特点 新生物一旦形成，不因病因消除而停止增生。它不受机体生理