MTT法和CCK8法检测中药抗病毒活性成分细胞毒性的比较.PDF

第３９卷第３期 湖北大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．３９　 Ｎｏ．３　 ２０１７年５月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ） Ｍａｙ，２０１７　 文章编号：１０００ ２３７５（２０１７）０３ ０３０５ ０６ ＭＴＴ法和 ＣＣＫ⁃８ 法检测中药抗病毒活性成分 细胞毒性的比较 蔡文涛 （１．湖北大学中药生物技术湖北省重点实验室，湖北 武汉，４３００６２；２．湖北省生物资源绿色协同创新中心（湖北大学）， 湖北 武汉，４３００６２；３．湖北大学生命科学学院，湖北 武汉，４３００６２） 摘要：中药抗病毒活性成分的筛选首先需要考察化合物在体外的细胞毒性．分别用ＭＴＴ法和ＣＣＫ⁃８法考察穿心莲 内酯和脱水穿心莲内酯这两种存在于中药穿心莲中具有抗病毒潜力的成分在人肺腺癌Ａ５４９细胞株的毒性情况．结果表 明，ＣＣＫ⁃８和ＭＴＴ两种方法检测得到的细胞存活率的数据具有一致性，均提示在Ａ５４９ 细胞株中，穿心莲内酯和脱水穿 心内酯的无毒浓度分别在０ ５ μｇ／ ｍＬ及０ １０ μｇ／ ｍＬ之间．用ＭＴＴ法测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的ＣＣ 值的 ５０ 变异系数（ＣＶ）均大于ＣＣＫ⁃８法得到ＣＶ，表明ＣＣＫ⁃８法检测的精密度较ＭＴＴ法更高．回归方程的拟合优度的判定系数和 细胞存活率的数据标准偏差数值表明ＣＣＫ⁃８法测定的准确度相对ＭＴＴ法更高．另外，ＣＣＫ⁃８法操作更为简便和快速，对 实验者和环境危害低．因而，ＣＣＫ⁃８法值得在细胞增殖和药物毒性检测等实验中推广应用． 关键词：ＭＴＴ；ＣＣＫ⁃８；细胞毒性；抗病毒成分 中图分类号：Ｒ９６６　 　 文献标志码：Ａ　 　 ＤＯＩ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃２３７５．２０１７．０３．０１６ Ｔｈｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ ｏｆ ＭＴＴ ａｎｄ ＣＣＫ⁃８ ｂｙ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ＣＡＩ Ｗｅｎｔａｏ （１．Ｈｕｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ），Ｗｕｈａｎ４３００６２，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｈｕｂｅｉ Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｒｅｆｏｒ Ｇｒｅｅｎ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏ⁃Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ（Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）， Ｗｕｈａｎ４３００６２，Ｃｈｉｎａ；３．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００６２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｓｔｅｐ ｏｆ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｈｅ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ（ＴＣＭ）． Ｉｎ ｏｕｒ ｓｔｕｄｙ，ＭＴＴ ａｎｄ ＣＣＫ⁃８ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｔｅｓｔ ｔｈｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｗｏ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ａ ＴＣＭ ｎａｍｅｄＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ，ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ ａｎｄ １４⁃ｄｅｏｘｙ⁃１１， １２⁃ｄｉｄｅｈｙｄｒｏａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ａ５４９ ｃ