猪β干扰素的表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性的初步研究的中期报告.docx

猪β干扰素的表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性的初步研究的中期报告 研究目的： 本研究旨在构建猪β干扰素表达质粒，利用转染技术将其转染至猪肺细胞，初步探究其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。 材料与方法： 1. 构建猪β干扰素表达质粒。 在pVAX1质粒基础上，采用PCR扩增技术克隆猪β干扰素基因片段，连接启动子、终止子等信号序列，构建表达质粒pVAX1-βIFN。 2. 猪肺细胞转染。 选取猪肺细胞进行转染实验，将pVAX1-βIFN质粒转染至猪肺细胞中，利用Western blot技术检测猪β干扰素的表达情况。 3. 活性检测。 将转染后的猪肺细胞分为实验组与对照组，分别感染猪繁殖与呼吸综合征病毒，并进行病毒复制及细胞生长的观察，以初步探究猪β干扰素的抗病毒活性。 结果与分析： 1. 构建成功pVAX1-βIFN表达质粒。 PCR扩增结果显示，成功克隆得到猪β干扰素基因片段，并与启动子、终止子等信号序列连接起来，构建了表达质粒pVAX1-βIFN。 2. 成功转染猪肺细胞。 Western blot结果显示，在转染后的猪肺细胞中成功表达了猪β干扰素。 3. 初步探究猪β干扰素的抗病毒活性。 实验组表现出较低的病毒复制情况与较快的细胞生长速度，而对照组则病毒复制迅速，并且细胞生长较为缓慢，初步显示出猪β干扰素的一定抗病毒活性。 结论： 本研究成功构建了猪β干扰素pVAX1-βIFN表达质粒，并且成功转染猪肺细胞。初步结果表明，猪β干扰素具有一定的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性，为下一步研究打下了基础。