牛奶中抗生素残留筛选检测方法CharmROSA.ppt

磺胺类 抗生素残留各国限量 四环素类 喹诺酮类 抗生素残留各国限量 氯霉素 链霉素 黄曲霉毒素M1 黄曲霉毒素M1 抗生素残留各国限量 Charm Rosa抗生素检测系统检测步骤 将检测条放入孵育器中 撕开检测条覆膜至检测条黑线处，露出样品室 Charm Rosa抗生素检测系统检测步骤 将300微升样品加入到样品室中 重新粘好检测条覆膜，并盖上孵育器顶盖 孵育3分钟或8分钟（根据试剂条不同决定） Charm Rosa抗生素检测系统检测步骤 判读结果 目测判读结果 Charm Rosa Reader判读结果 阴性样品 阳性样品 谢谢大家wujianping_2001@163.com 牛奶中抗生素残留筛选检测方法—Charm ROSA检测系统介绍 上海市动物疫病预防控制中心 残留检测室 Charm ROSA抗生素快速检测系统 乳品中抗生素残留的危害 乳品中抗生素残留的危害 药物名称 危害 磺胺类药物 Sulfonamides 对甲状腺、下丘脑中枢神经系统的毒性作用 链霉素 Streptomycin 对肾脏和听觉的毒性作用，对于胎儿有致畸作用 青霉素 Penicillin 食用牛奶后出现过敏反应：皮疹、药热等 土霉素 Oxytetracycline 可诱发人体肠道内的大肠菌群的耐药性 肠道菌群 正常人肠道中的菌群，主要为厌氧菌，少数为需氧菌 存在于肠道的正常菌群为类杆菌、乳杆菌、大肠杆菌和肠球菌等 在正常情况下，这些微生物互相依存，互相制约,维持平衡、保持一定的数量和比例 肠道菌群失调 使用抗生素不当时 危害： 定位转移：如寄生在肠道的大肠杆菌可转移到呼吸道，发生支气管炎和肺炎 自身感染：如肠道中大肠杆菌可引起原发性腹膜炎和败血症 比例失调：肠道正常菌群减少或显著减少，过路菌过量繁殖，引起菌群失调的症状，如应用后引起难辨梭状芽胞杆菌所致的伪膜性肠炎。 抗生素残留与耐药性 耐药性（抗药性）：指病原微生物对抗生素等药物所产生的耐受和抵抗能力 危害： 超级细菌的出现，如NDM-1 抗生素药效降低，甚至无药可用，危害甚至超过HIV 传播途径： 人食用或饮用动物性食品，食品中的抗生素残留长期作用于人体，导致抗药菌的出现 乳品中抗生素残留检测方法 仪器分析方法:高效液相色谱串联质谱法等 微生物检测法：TCC法、PD纸片法等 免疫分析法：ELISA法、放射免疫法等 仪器分析方法检测抗生素残留：确认方法 Angilent液相色谱串联四级杆-飞行时间质谱联用仪 国家先后推出系列相关标准：农业部公告、国标等 同时具有分离、定量、定性的功能 检测灵敏度高、精度高、准确 检测程序复杂，检测成本高, 技术要求高 适用于大型实验室检测 微生物方法检测抗生素残留：筛选方法 微生物抑制法检测原理 国标方法：TCC法（GB4689.27-94） 检测费用低，操作简单 检测时间长，检测精度和灵敏度不高 肉眼检测，容易产生误差 免疫分析方法检测抗生素残留：筛选方法 ELISA法，放射免疫受体法 检测速度快，操作简单 具有较高的灵敏度和检测精度 农医发[2010] 32号补充说明可以使用快速检测方法 检测方法 样品处理 是否需标准品 测量 耗时 优点 缺陷 气相色谱质谱联用法（GC-MS） 液相色谱质谱联用法（HPLC-MS） 最复杂 是 定量 2～3小时 结果准确，检测精度高，灵敏度高 仪器价格昂贵且方法操作复杂，存在检测成本高、检测周期长、对检测人员的技术要求较高，需要较复杂的样品处理过程 微生物抑制法 (TCC) 简单 否 定性 3小时 费用低廉，使用方便 检测时间长，检测灵敏度低，结果不容易判断，假阳性率高，只对青霉素等几种药品能达到国家要求的限量标准 酶联免疫法（ELISA） 较复杂 是 定量 2～3小时 操作简单，使用方便 假阳性率较高，检测时间长 Charm Rosa 抗生素检测系统 无需处理 否 定性 3～8分钟 具有良好的特异性和灵敏度，抗干扰能力强，可以检测成品，操作更加简单方便，一步测试，用时只需3或8分钟 有一定假阳性率 确认方法 筛选方法 抗生素残留检测方法比较 Charm ROSA 抗生素残留检测系统 抗原-抗体识别 VS 配体-受体识别 在检测抗生素时，抗原-抗体法存在很多问题：抗体难以制备，水解问题等 抗原-抗体识别 能够刺激免疫系统产生抗体的外源物质称为抗原 抗体可以识别抗原表面的结合位点，称为表位 一种抗原可以有多个结合位点，对应多种不同的抗体 某些小分子单独不能刺激免疫系统产生抗体，当偶联其他大分子后，也能产生抗体，这些小分子称为半抗原 能够识别同一抗原的不同种抗体对该抗原的亲和力可能不同，称为效价不同 Charm Rosa抗生素检测条结构 样品 质控线 待检药物 胶体金颗粒