甘薯脱毒种苗繁育技术规程.docx
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DB14/T1161—2015
甘薯脱毒种苗繁育技术规程
1范围
本标准规定了甘薯脱毒种苗繁育的术语和定义、甘薯脱毒、脱毒试管苗繁育及移栽、脱毒种薯生产及种苗繁育、病虫害预防。
本标准适用于甘薯脱毒种苗的繁育。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB7413甘薯种苗产地检疫规程
NY/T1200甘薯脱毒种薯
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
脱毒试管苗
应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带甘薯羽状斑驳病毒（SPFMV）、甘薯潜隐病毒（SPLV）和甘薯(SPVD)病毒，在容器内繁殖的种苗。
3.2
原原种（苗）
在60目的防虫网棚内或温室栽植脱毒试管苗生产的符合NY/T1200相应质量标准的种薯（苗）。
3.3
原种（苗）
用原原种作种薯，在大于1000m隔离条件下生产的符合NY/T1200相应质量标准的种薯（苗）。
3.4
生产用种（苗）
用原种作种薯，在大于500m隔离条件下生产的符合NY/T1200相应质量标准用于商品薯生产的种薯（苗）。
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4甘薯脱毒
4.1品种选择
通过国审或省审（认）定的适宜于本生态区种植的品种。在留种田挑选具有品种特征特性，茎叶生长健壮，叶片无叶斑、无花叶、无卷叶、无皱缩、无黄花等病症表现的薯块。
4.2盆栽育苗
将选择的薯块进行盆栽育苗，薯苗长至6～8片叶即可。
4.3消毒
4.3.1组培实验室消毒
提前5～7d对实验室进行空间消毒，每1m3用40%甲醛20mL、高锰酸钾15g，先将高锰酸钾放入容器内，再注入甲醛溶液，密闭熏蒸24h。
4.3.2器具消毒
将用于组培的所有器具用75%酒精均匀擦拭消毒或121℃灭菌20min。
4.3.3操作前消毒
工作人员应用肥皂仔细清洗手臂，更换消过毒的工作服、工作鞋、工作帽。进入操作台用75%酒精严格擦拭双手或戴无菌手套进行操作。
4.4无菌苗培育
将盆栽苗剪成2cm～3cm的茎段，0.1%洗衣粉溶液浸泡20min，自来水冲洗20min～30min，用75%酒精、0.05%Hgcl2在超净台下分别消毒40s、8min～10min，接入普通MS培养基中，在温度26℃~28℃,光照1800LX～2000LX，光照时间8h/d条件下培养25d左右，获得无菌苗。
4.5茎尖苗培育
4.5.1茎尖剥离
将无菌苗在40倍解剖镜下，剥离带1～2个叶原基的茎尖分生组织。
4.5.2茎尖苗诱导
将剥离的茎尖分生组织放入添加0.5mg/L～1.5mg/L6-BA的MS培养基上，培养条件同4.4，50~60d后，茎尖成苗。
4.6茎尖苗病毒检测
单个茎尖苗株系在MS培养基中扩繁至100株左右时进行病毒检测。按照NY/T402采用血清检测法和指示植物检测法进行病毒检测,获取脱毒试管苗。
5脱毒试管苗繁育及移栽
5.1组培室繁育
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将确认的脱毒试管苗切成一叶一节或两叶两节的茎段，扦插在1/2MS培养基上，培养条件同4.4，40～45d进入下一轮扩繁，循环数代至移栽。
5.2网棚繁育
5.2.1整地建棚
苗圃地按N：P2O5：K2O=1：0.6～0.8：1.2～1.4比例施肥，中等肥力地块666.7m2施尿素15kg，磷酸二铵20kg～25kg，硫酸钾18kg～20kg，深翻、整细、耙平。搭建60目的防虫网棚。
5.2.2移栽时间
4月中旬至5月上旬，0cm～5cm地温稳定至15℃以上开始移栽。
5.2.3试管苗准备
将长至5～6片叶的试管苗用镊子轻轻从培养瓶中夹出，去掉老叶、残留培养基。
5.2.4试管苗移栽
开沟8cm～10cm，试管苗按株距8cm、行距15cm、深度2cm～3cm移栽，搭建60cm宽、50cm高的小拱棚。气温上升至30℃以上时，需覆盖遮阳网以保持棚内温度20℃~35℃。
5.2.5管理
5d左右在拱棚薄膜上打孔透气，每1m23～4个孔，孔径1cm，10d左右增加至5～7个，孔径2cm~3cm，而后逐渐加大透气孔，20d后可逐步去掉拱棚。
6脱毒种薯生产及种苗繁育
6.1脱毒种薯生产
6.1.1原原种生产
5月底至6月上旬将移栽成活的试管苗剪成20cm长，栽插至60目的