SN_T 4136-2015出口芦荟干粉中芦荟甙含量的测定 高效液相色谱法.pdf

SN..a?中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4136---2015出口芦荟干粉中芦荟贰含量的测定高效液相色谱法Determination of aloin in aloe powder for export-HPLC method2015-09-01实施2015-02-09 发布中华人民共和国发布典国家质量监督检验检疫总局实具伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准出口芦荟干粉中芦荟武含量的测定高效液相色谱法SN/T 4136—2015*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 （880X12301/16印张 0.5字数 10千字2015年11月第一版2015年11月第一次印刷印数 11100*书号：155066·2-29058 SN/T 4136—2015前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国安徽出人境检验检疫局、中华人民共和国云南出人境检验检疫局0本标准主要起草人：张萍、彭云霞、余晓峰、韩芳、朱梦栩、姚剑、胡艳云。I SN/T 4136—2015出口芦荟干粉中芦荟贰含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了出口芦荟干粉中芦荟武含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于以库拉索芦荟为原料制成的食用芦荟干粉中芦荟含量的定量测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696：1987,MOD)）3方法提要试样直接用甲醇水溶液超声提取，采用配有二极管阵列或紫外检测器的液相色谱仪测定，标准曲线外标法定量。4.试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的-级水。4.1甲醇:色谱纯。4.2乙酸：优级纯。4.3芦荟标准品：C20H20O：，CAS号1415-73-2，纯度大于等于98%。4.4芦荟武标准储备液：准确称取 10.0 mg（精确至 0.1 mg)芦荟贰标准品于 10 mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液，一18℃下避光可保存1周。4.5微孔滤膜：有机系，0.45um。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列或紫外检测器。5.2分析天平:感量为0.1 mg。5.3超声波清洗仪。5.4离心机:转速不低于4 000 r/min。6测定步骤6.1样品前处理芦荟干粉经磨碎成均匀粉状试样后，准确称取0.5g（精确至0.1mg），置于50 mL容量瓶中，加人1 SN/T 4136—201530 mL甲醇,立即在超声波清洗仪中冰水浴超声提取5 min,取出后以水定容,转入 100 mL离心管。在4 000 r/min下离心分离5min后，取上清液经微孔滤膜过滤后供高效液相色谱仪测定。如不能及时完成测定，样液应置于0℃～4℃冰箱避光保存，此条件下可保存24h。6.2测定6.2.1液相色谱条件液相色谱条件如下：a）色谱柱;Ci8柱,250 mm×4.6 mm（内径）,5 μm,或相当者;b）流动相：甲醇十1%乙酸溶液（50十50，体积比）；c)流速:1.0 mL/min;d）检测波长：359nm；e)进样量：10μL;f)柱温:30℃。6.2.2标准曲线取芦荟武标准储备液（4.4）以水稀释至浓度为10、20、50、70、100mg/L的系列标准工作液，按照6.2.1色谱条件，按浓度由低到高的顺序进样检测，以峰面积-浓度作图，绘制标准曲线。6.2.3定量按照6.2.1色谱条件测定试样和标准工作溶液，待测物质色谱峰相对保留时间应在士2.5%以内。待测样液中芦荟武含量应在标准曲线线性范围内，超出线性范围则应以水进行适当稀释。芦荟武的保留时间约为8.54 min，标准溶液的色谱图参见附录A中图A.1。7 计算样品中芦荟贰含量按式（1)进行计算：w=XV×1 000(1)m ×1 000式中:样品中芦荟武的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；!从标准曲线上得到的样液中芦荟武浓度，单位为毫克每升（mg/L）；?V样液最终定容体积，单位为毫升（mI）；最终样液所代表的样品量，单位为克（g）。m -计算结果保留三位有效数字。8测定低限和回收率8.1测定低限本方法的测定低限为 2 mg/kg。8.2回收率不同添加浓度的回收率数据见表1。2 SN/T 4136-2015表1 添加浓度水平及回