药物的含量测定方法与验证_培训课件.ppt

* f: 校正因子C样: 低浓度样品溶液的浓度值A样：低浓度样品溶液的的吸光度值 适用于不能直观比较信噪比的仪器分析方法, 如UV-Vis法 用空白样品进行多次分析，求的方法背景响应值的标准偏差S空，再将3倍S空作为检测限估算值。 3.标准偏差法 四、检测限(limit of detection, LOD) * 五、定量限(limit of quantitation, LOQ) 定量限(limit of quantitation, LOQ) 指在具有一定准确度和精密度的条件下，样品中被测物能被准确定量测定的最低量。 杂质和降解产物用定量方法研究时, 应确定LOQ LOQ的测定方法与LOD相同，相应的系数(倍数)不同, 如信噪比S/N=10 数据要求：附测试图谱(测试过程和定量限)、结果的准确度和精密度。 * 六、线性(linearity) 线性系指在设计的“范围”内, 响应值(y)与被测物浓度(x)直接呈正比关系的程度 y = ax + b 系列(n≥5)供试样品测定,以响应信号作为被测物浓度的函数作图，用最小二乘法进行线性回归; 或经数学转换后再进行线性回归。 含量测定和杂质定量检查。 数据要求：回归方程、相关系数和线性图。 * 七、范围(range) 范围系指能达到一定精密度,准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 在试验研究开始前确定验证的范围和方法。 涉及定量测定的项目均需对范围进行验证，如: 含量测定, 含量均匀度, 溶出度或释放度, 特殊元素或特殊杂质的定量检查 * 原料药/制剂含量测定: 80%~120% 制剂含量均匀度检查: 70%~130% 溶出度或释放度检查: 下限-20%~上限+20% 特殊元素含量测定: 下限-20%~上限+20% 杂质测定: 限度±20% 七、范围(range) * 八、耐用性 耐用性系指在测定条件有小的变动时, 测定结果不受影响的承受程度; 体现测定条件的允许变动范围。 鉴别、检查（杂质限度、杂质限量）和含量测定。 * 八、耐用性 一般分析方法：被测溶液的稳定性，样品的提取次数、时间，试剂来源。 HPLC法典型因素有: 流动相的组成和pH值及流速, 不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱, 柱温等 GC法典型因素有: 不同厂牌或批号的色谱柱, 固定相, 不同类型的担体, 柱温, 进样口和检测器温度等 * 九、验证内容的选择 验证内容选择的一般原则: 非定量分析方法 如鉴别,杂质的限度检查法: 验证“专属性”,“检测限”和“耐用性” 定量分析方法 如原料药或制剂的含量测定及含量均匀度,溶出度或释放度的测定方法: 除“检测限”和“定量限”外, 其余均验证 微量定量分析方法 如杂质的定量测定方法: 除“检测限”视情况而定外, 其余均验证 * 检验项目和验证内容： 　　　项目内容　　　 鉴别 杂质测定 含量测定及溶出量测定 定量 限度 准确度 ＋ ＋ 精密度 － ＋ 重复性 ＋ ＋ 中间精密度 ＋① ＋① 专属性② ＋ ＋ ＋ ＋ 检测限 －③ ＋ － 定量限 ＋ － 线性 ＋ ＋ 范围 ＋ ＋ 耐用性 ＋ ＋ ＋ ① 已有重现性验证，不需验证中间精密度 ② 如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充 ③ 视具体情况予以验证 * 小结 掌握 定量分析方法的分类与特点 选择分析方法的原则 相关含量计算 分析方法的验证内容和选择 了解 样品前处理方法 1.鉴别试验 2.杂质定量或限量检查 3.原料药或制剂中有效成分含量测定 4.制剂中其他成分（降解产物、防腐剂等）的测定 5.药品制剂溶出度、释放度等，检查其溶出量的测试方法 * 衡量分析方法是否受到干扰 * 含卤素药物的燃烧产物 ③ 碘化物 R-I I2+I-+IO3-+IO_+CO2+H2O O2/Pt 量大 微量 量少 银量法 I-+Ag+ → AgI 水-氢氧化钠-SO2饱和溶液 碘量法 I2+2S2O32- S4O62-+2I- 水-氢氧化钠溶液吸收，用溴-醋酸溶液氧化为IO3- 再用KI还原为I2 2、氧瓶燃烧法 * 含硫药物的燃烧产物 R-S SO3+H2O+CO2 O2/Pt SO3+H2O2+H2O SO42- SO42-+BaCl2 BaSO4 2、氧瓶燃烧法 * 含磷药物的燃烧产物 R-P P2O5+H2O+CO2 O2/Pt P2O5+HNO3+H2O H3PO4 采用磷钼蓝比色法测定含量 磷酸+钼酸铵 磷钼酸 磷钼蓝 还原剂 2、氧瓶燃烧法 * 含硒药物的燃烧产物 R-Se Se