抑制Dicer基因对乳腺癌细胞MCF7周期和药物敏感性的影响.pdf

中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 硕士研究生毕业(学位)论文 抑制Dicer基因对乳腺癌细胞MCF．7周期和药物敏感性的影响 中文摘要 目前研究已经证实了多种miRNA参与了肿瘤的发生和发展过程，一些肿瘤中亦可见 敏感性的改变，探讨Dicer对肿瘤细胞增殖和药物敏感性的影响，为提高乳腺癌治疗 效果提供理论指导。合成带有荧光标记、特异性干扰Dicer基因的siRNA序列，应用 脂质体lipofectamine 的转染效率并用Westernblot方法验证。在于扰效率最高的时间点，流式细胞术检测 转染后MCF一7细胞周期的变化，XTT法评价转染前后细胞对不同浓度化疗药物顺铂 Western 小时抑制效果最明显，此时细胞出现明显的G1期阻滞，转染后MCF．7细胞在顺铂 uM、5．0uM、lOu 浓度为2．5 M的剂量下药物敏感性提高。进一步研究发现siRNA 转染组p21，p27的蛋白表达升高，在乳腺癌中发挥癌在基因作用的miR一21明显减少。 物顺铂的敏感性提高，这与细胞周期调控和增殖调控相关的miRNA的改变有关。 Dicer干扰为提高肿瘤治疗敏感性、改善病人生存率提供了新的策略。 关键词：Dicer；siRNA；microRNA；细胞周期；药物敏感性 中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 硕士研究生毕业(学位)论文 Abstract 22nucleotide RNA．Recent MicroRNAs(miRNAs)areapproximately non-coding researcheshaveshownthataberrant ofmiRNAsinvarioushumancancers expression rolefor in cancerisoneofthemostcommon a miRNAs suggests tumorigenesis．Breast tumorsin incidencerateis tothe malignant women,whose nearlyup first，severely threatenswomen’Shealthandlife．Itis thataberrant ofmiRNAs reported expression play in and isanessential roles chemosensitivity．Dicer importantcarcinogenesis，progression memberoftheRNaseIII which executesthe of of family specifically cleavageprecursors 70 thematurationofmiRNAsinthe nucleotides(pre-miRNAs)and approximately miRNAsthen the totheir ability cytoplasmicprocessing，maturatedpossesinhibiting translational