金银花组织培养无菌体系的建立.pdf

第 26卷 第 3期 新 乡学院学报 (自然科 学版) 2009年 6月 VolI26 No．3 JournalofXinxiangUniversity(Natura1ScienceEdition) Jun．2009 金银花组织培养无菌体系的建立 任 敏 ，赵红艳 (新乡学院 生命科学与技术系，河南 新乡 453003) 摘 要 ：以河南封丘金银花品种带腋芽茎段为外植体建立无菌体系，通过不 同的灭茵剂进行时间和浓度梯度 的对 比，以及两种灭茵剂混合使用对外植体进行灭菌处理，得 出最佳灭茵组合 ：先用 75 的酒精灭茵 45S，然后用 0．15 HgCI2灭菌8rain。 关键词 ：金银花 ；组织培养 ；外植体 ；灭菌 中图分类号：$567．79 文献标志码 ：A 文章编号 ：1674—3326(2009)03—0049—03 TissueCultureandRapidPropagationofLoniceraJaponicaThunb REN M in．ZHAo Hong-yan (DepartmentofLifeScienceandTechnology，XinxiangUniversity，Xinxiang453003，China) Abstract：ThestemswithaxillarybudsofHenanFengqiuLonicerajaponicaThunbweretakenasexplantstObuilda— septicsystem ．ThisexperimentusedifferentdisinfectantatdifferenttimeandconcentrationtOtreatexplant，andthe resultshowedthatthebestmethodisusing75％ethanolfor45satfirstandfollowingwith0．15 HgC12for8min． Keywords：lonicerajaponicathunb；tissueculture；explant；sterilization 0引言 如培养基及各种接种工具灭菌不彻底 ，操作时人为 金银花 (LonicerajaponicaThunb)属 忍冬科忍 带菌 ，超净工作 区及环境不清洁等，这类污染可以通 冬属植物 ，又名忍冬、双花 、银花、二宝花 ，是多年生 过严格遵循操作规范得到控制。二是外植体 自身带 半常绿木质藤本 。[1其节间中空，节部膨大，不定根 菌 ，尤其是 内部带菌很不容易被清除掉 ，因此 ，外植 发达 ；单叶对生 ，叶片卵形或长卵形 ，两面被柔毛；每 体的种类 、取材季节和 时间、预处理方法 、灭菌药剂 叶腋内由二花组成一小聚伞花序 ，花两侧对称 ，花冠 的种类 、质量浓度与时间以及方法，就成为获得组织 唇形 ，初开时为 白色 ，2～3d后变成金黄色，故名金 培养成功前必须研究和解决的问题 。 银花 。L2 金银花为常用中药材 ，含有绿原酸、异绿原酸、 1材料及预处理 黄酮化合物、芳樟醇 、花醇等化合物 ，其中绿原酸和 选择封丘金银花健壮带腋芽茎段作为外植体。 异绿原酸为主要有效成分 [s3具有清热解毒 、凉散风 将取 回的金银花枝条置于水槽 中，用软毛刷刷 热的功效，因其具有抑菌谱广、疗效显著、毒副作用 洗表面，自来水冲洗洗净表面尘土，吸干外植体表面 小的特点，故广泛应用于 中医临床及中成药生产 。 的水分 ，再将其剪成 2cm 左右