莫氏反应实验报告.doc
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莫氏反应实验报告
糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应
糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应
一、目的
1.了解糖类某些颜色反应的原理。
2.学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。
二、颜色反应
(一)α-萘酚反应(Molisch反应)。
1.原理 糖在浓无(转载于:www.xiElw.coM 写论文 网:莫氏反应实验报告)机酸(硫酸、盐酸)作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性,故此反应不是糖类的特异反应。
2.器材
(1)试管及试管架(2)滴管
3.试剂
(1)莫氏( Molisch)试剂: 5% α-萘酚的酒精溶液称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100mL,贮于棕色瓶内。用前配制。
(2)1%葡萄糖溶液 100mL
(3)1%果糖溶液 100mL
(4)1%蔗糖溶液 100mL
(5)1%淀粉溶液 100mL
(6)0.1%糠醛溶液 100mL
(7)浓硫酸 500mL
4.操作
取5支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、 0.1%糠醛溶液各 1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂,充分混合。
斜执试管,沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察、记录各管颜色。
(二)间苯二酚反应(Seliwanoff反应)
1.原理
在酸作用下,酮糖脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。
2.器材
(1)试管及试管架
(2)滴管
(3)水浴锅
3.试剂
(1)塞氏(Seliwanoff)试剂 0.05%间苯二酚-盐酸溶液
100 mL
称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100 mL
(2)1%葡萄糖溶液 100mL
(3)1%果糖溶液 100mL
(4)1%蔗糖溶液 100mL
4.操作
取3支试管,分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 mL。再向各管分别加入塞氏试剂 5 mL,混匀。将3支试管同时放入沸水浴中,注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。
思考题
1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在?
2.α-萘酚反应的原理是什么?
实验总结
(一)α-萘酚反应
(二)间苯二酚反应
篇二:实验一 糖和蛋白质的理化性质检验
实验一 糖和蛋白质的理化性质检验
(4学时)
第一部分 蛋白质的理化性质
第一节 蛋白质的颜色反应
一、实验目的
掌握鉴定蛋白质的原理和方法。
二、实验原理
蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用,可产生特定的颜色反应,不同蛋白质所含氨基酸不完全相同,颜色反应亦不同。颜色反应不是蛋白质的专一反应,一些非蛋白物质亦可产生相同颜色反应,因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物是否是蛋白质。颜色反应是一些常用的蛋白质定量测定的依据。
三、实验器材与试剂
实验器材
1. 鸡蛋1个
2. 吸管1.0mL(×1)
3. 试管 1.5cm×15cm(×2)
4. 试管架
5. 试管夹2个
6. PH试纸(5-7)
7. 水浴锅
实验试剂
1. 卵清蛋白液:将鸡(鸭)蛋白用蒸馏水稀释20-40倍,离心,上清液冷藏备用。
2. 1%茚三酮溶液: 1g茚三酮溶于95%乙醇并稀释至100mL。
3. 浓硝酸: 比重1.42。
4. 10%NaOH溶液:10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mL。
四、实验方法
A. 黄色反应
蛋白质分子中含有苯环结构的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)。遇硝酸可硝化成黄色物质,此物质在碱性环境中变为橘黄色的硝苯衍生物(苯及苯丙氨酸较难硝化,需用浓硫酸促进之。反应如下:
操作方法:于一试管内,置蛋白质溶液10滴及浓硝酸5滴,加热,冷却后再加10%NaOH溶液20滴,观察颜色变化。
B. 茚三酮反应
蛋白质与茚三酮共热,则产生蓝紫色的还原茚三酮、茚三酮和氨的缩合物。此反应为一切蛋白质及a-氨基酸所共有。含有氨基的其他物质亦呈此反应。亚氨基酸(脯氨酸和羟脯氨酸)与茚三酮反应呈黄色。
操作方法:取1mL蛋白质溶液置于试管中,加3-5滴茚三酮试剂,加热至沸,即有蓝紫色出现。
注意:此反应必须在pH5-7进行。
C.双缩脲反应(参考实验)
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而形成双缩脲。双缩脲在碱性环境中,能与硫酸铜结合成红紫色的络合物,此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中含有肽键与缩脲结构相似,故能呈此反应(双缩脲反应可用以鉴定蛋白质是否完全水解,及用比色法作蛋自质之定量测定)。其反应式如下:
操作方法:
1. 取少许结晶尿素放在干燥
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