甘薯茎线虫乙酰胆碱酯酶基因ace-3全长cDNA的克隆与序列分析.pdf

农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (2): 326~331  ·研究论文 · 甘薯茎线虫乙酰胆碱酯酶基因 全长 cDNA 的克隆和序列分析 *  12 1  2 1 1  ， ** 丁 中  ， 彭德良  ， 高必达  ， 黄文坤  ， 贺文婷  (1.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 ， 北京 100094； 2.湖南农业大学生物安全科学技术学 院， 长沙 410128)  摘要: 利用 RT­PCR 结合 RACE 技术克隆了甘薯茎线虫(  )乙酰胆碱酯酶基 因 cDNA， ， 提交 GenBank 登录号 EF583057。该 cDNA 序列 5端存在反式剪接引导序列 SL1， 全长 2 517bp ,包含一个 1836bp 的开放阅读框 ； 在推导出的 611个氨基酸残基的前体蛋白 中,N 端的前 21个氨基酸残基为信号肽,C­28 的位置存在糖基磷脂酰肌醇 (GPI)锚 ， 除此之外的 562 , 64396.81D , 定位点 个氨基酸残基是成熟的乙酰胆碱酯酶序列 其预测 的分子量为 。 在一级结构 中 形成催化活 3 (Ser232 Glu360 His479) 6 ； 在电鳐 乙酰胆碱酯 性中心的 个氨基酸残基 、 和 ， 以及在亚基内形成二硫键 的 个半胱氨酸完全保守 14 , 12 。 该酶的氨基酸 酶分子的催化功能域 中存在 个保守 的芳香族氨基酸残基 其中 个在甘薯茎线虫乙酰胆碱酯酶中完全保守 (  )ACE­3 ACE­4 56.1% 50.0% 序列与秀丽小杆线虫 和 的同源性达 和 。与其它线虫和物种乙酰胆碱酯酶的 聚类分析显示 ， 甘薯茎线虫 的乙酰胆碱酯酶与 芋型乙酰胆碱酯酶 ACE­3 同属一个支系 。 ； 乙酰胆碱酯酶； ； 序列分析 关键词: 甘薯茎线虫 cDNA 克隆 中图分类号: S188  文献标识码: A  文章编号: 1006­1304(2008)02­0326­06  Cloningand SequenceAnalysisofaNew AcetylcholinesteraseGene